一种快速鉴定恙虫病立克次体的LAMP引物组、试剂盒及方法

摘要

本发明公开了一种快速检测恙虫病立克次体的引物组、试剂盒及方法。检测引物组包括一对外引物、一对内引物和一对环引物；检测试剂盒包括引物液、反应液、DNA聚合酶、逆转录酶、对照和显色剂。其检测方法是通过提取待检病原体RNA，利用逆转录酶的逆转录活性，采用六条特异性引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在60～65℃对样品RNA模板进行扩增，加入显色剂观察反应管内的颜色变化来判断扩增与否。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点，适于推广应用。

主权项

用于快速鉴定恙虫病立克次体的RT‑LAMP特异性引物组，其特征在于，包括：内引物1：5’‑ TTGCTACACCAAGTGCTCCTGATATGCTGGTCTTGGTGC‑3’（SEQ ID No.1）；内引物2：5’‑ TTAATGCTGCTGAGGGTGTGTCGCATTTACCGAGTACTTATCT‑3’（SEQ ID No.2）；外引物1：5’‑ TTGATCTGAGTATGATTGTCGG ‑3’（SEQ ID No.3）；外引物2：5’‑GAAGTTATAGCGTACACCTACA‑3’（SEQ ID No.4）；环引物1：5’‑ GCAACCATACCTGTATGCC‑3’ （SEQ ID No.5）；环引物2：5’‑ ATGTGGACATAGAAGGTGGTT‑3’ （SEQ ID No.6）。