胃毒性杀虫剂或转基因杀虫蛋白对意大利蜜蜂幼虫潜在毒性的检测方法

摘要

本发明提供了一种简单灵敏的检测胃毒性杀虫剂或转基因杀虫蛋白对意大利蜜蜂幼虫直接毒性影响的检测方法。该方法通过把受试杀虫化合物均匀地混入人工饲料中直接饲喂给意大利蜜蜂幼虫，并以加入浓度为0.1％(w:w)大豆胰蛋白酶抑制剂SBTI的人工饲料为阳性对照，以纯人工饲料为空白对照，通过比较分析处理组和对照组意蜂幼虫生存率、发育历期、预蛹体重和羽化率等重要生命指标测定受试杀虫化合物对意蜂幼虫的潜在毒性。利用本方法测定了不同浓度SBTI对意蜂幼虫的毒性，结果显示：意蜂幼虫不同生命参数与饲料中SBTI的浓显示出明显的剂量-效应关系，这说明了该方法的有效性和灵敏性。

主权项

胃毒性杀虫剂或转基因杀虫蛋白对意大利蜜蜂幼虫潜在毒性的检测方法，该方法通过把受试杀虫化合物均匀地混入人工饲料中直接饲喂给意大利蜜蜂幼虫，通过分析意蜂幼虫生命指标评估受试杀虫化合物的潜在毒性，其特征在于，所述人工饲料含有如下组分：蜂王浆45‑55重量份，去离子水35‑40重量份，果糖6‑10重量份，葡萄糖3‑5重量份，酵母粉0.8‑1.5重量份，该方法包括如下步骤：1)受试幼虫准备；2)用移虫针将1.5‑2d龄幼虫轻轻转入细胞培养皿的孔穴中，每孔1头幼虫，然后利用移液枪小心地将液态人工饲料加到幼虫周围，使虫体漂浮在饲料上，每天更换饲料；3)幼虫排便后(幼虫老熟)，将老熟幼虫用移虫针取出放在吸水纸上，轻轻地翻滚虫体，吸除虫体表面沾有的饲料，称重后转移到新的、孔穴底部垫有滤纸的细胞培养皿中，继续观察，直至羽化；4)试验在人工气候箱中进行，温度为34±1℃，无光照，相对湿度70‑90％，幼虫阶段的相对湿度高于预蛹至成虫羽化阶段，每个试验处理设多个重复；5)实验过程中间隔固定时间观察一次受试蜜蜂，记录幼虫死亡率、发育历期、老熟幼虫体重、成虫羽化率及新羽化成虫体重这些生命参数；6)采用合适的生物统计方法比较分析所得生命参数数据，得出试验结论。