一种快速检测羊肚菌菌丝活力的方法

摘要

本发明涉及一种快速检测羊肚菌菌丝活力的方法。将待测菌株于母种平板培养基中培养后，切取平板上的菌块，转至液体深层培养基中震荡培养，得菌液。取菌液于离心管中，离心，去除上清液，提取菌丝，以生理盐水冲洗菌丝。称量菌丝重量，加入水，配成待测菌液。准确移取待测菌液、Tris-HCl缓冲液和TTC(2，3，5-氯化三苯基四氮唑)溶液至离心管中反应。反应后，立即将反应液放置冰上，4℃离心，得细胞沉淀，于离心后的细胞沉淀中加入萃取剂，得萃取液。将萃取液离心，取上清液，于485nm波长下测定吸光度值。与传统的依据菌丝特征检测菌种活力相比该法具有测定结果稳定可靠、重现性好、准确度高、操作方便、速度快等优点。

主权项

一种快速检测羊肚菌菌丝活力的方法，其特征在于包括如下步骤：1)菌丝培养：将待测菌株于母种平板培养基中培养后，切取平板上的菌块，转至液体深层培养基中震荡培养，得菌液；2)样品前处理：取菌液于离心管中，离心，去除上清液，提取菌丝，以生理盐水冲洗菌丝；3)配制待测菌液：称量菌丝重量，加入水，配成待测菌液；4)与TTC反应：准确移取待测菌液、Tris‑HCl缓冲液和TTC溶液至离心管中反应；5)终止反应：反应后，立即将反应液放置冰上，4℃离心，得细胞沉淀，于离心后的细胞沉淀中加入萃取剂，得萃取液；6)测定萃取液OD₄₈₅：将萃取液离心，取上清液，于485nm波长下测定吸光度值。