低丰度差异蛋白的分离方法及其应用

摘要

本发明提供了一种低丰度差异蛋白的分离方法，包括：获取健康对照组蛋白样品、患者对照组蛋白样品和待测组蛋白样品；将健康对照组蛋白样品作为抗原进行免疫，制备高丰度蛋白多抗，并以该高丰度蛋白多抗为亲和配体制备高丰度亲和层析柱；将患者对照组蛋白样品于高丰度亲和层析柱过柱，收集流穿组份；将流穿组分浓缩后作为抗原进行再次免疫，制备低丰度蛋白多抗；并以低丰度蛋白多抗作为亲和配体制备低丰度亲和层析柱；将待测组蛋白样品于低丰度亲和层析柱进行过柱，并收集洗脱组分。采用本发明的过程可以一次直接分离得到正常血浆中含量较多的上调蛋白，降低了分离过程的繁复性，而且直接针对差异表达的低丰度蛋白，具有更高的特异性和针对性。

主权项

一种低丰度差异蛋白的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：获取健康对照组蛋白样品、患者对照组蛋白样品和待测组蛋白样品；将健康对照组蛋白样品作为抗原进行免疫，制备高丰度蛋白多抗；并以所述高丰度蛋白多抗为亲和配体与固相基质制备高丰度亲和层析柱；将患者对照组蛋白样品于所述高丰度亲和层析柱进行过柱，并收集流穿组份；将所述流穿组分浓缩后作为抗原进行再次免疫，制备低丰度蛋白多抗；并以所述低丰度蛋白多抗作为亲和配体固定与固相基质制备低丰度亲和层析柱；将待测组蛋白样品于所述低丰度亲和层析柱进行过柱，并收集洗脱组分。