发明名称 |
一种利用2-DE技术筛选钝齿棒杆菌内源高表达启动子的方法 |
摘要 |
一种利用2-DE技术筛选钝齿棒杆菌内源高表达启动子的方法,属于蛋白质组学和基因工程领域。本发明首先通过2-DE技术结合质谱技术鉴定出钝齿棒杆菌胞内高表达蛋白点。克隆其编码基因启动子,分别命名为P-argC、P-argG、P-argF、P-ilvC和P-serA,替换穿梭载体pDXW-8上的tac启动子,并在其下游插入cat基因,分别转化大肠杆菌JM109和钝齿棒杆菌SYPA5-5,通过测定CAT的活性,各启动子在重组菌中的活性:P-argG>P-argF>P-ilvC>P-serA>P-argC。这是首次获得来自钝齿棒杆菌组成型高表达启动子,为钝齿棒杆菌高表达外源基因提供了有效的工具。 |
申请公布号 |
CN103074343B |
申请公布日期 |
2015.10.14 |
申请号 |
CN201310043507.0 |
申请日期 |
2013.02.04 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
饶志明;许正宏;张博慧;徐美娟 |
分类号 |
C12N15/113(2010.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12N15/77(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/15(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/113(2010.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
N‑乙酰‑γ‑谷氨酰胺磷酸脱氢酶基因启动子,其特征在于:序列如SEQ ID NO:1所示。 |
地址 |
214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号江南大学 |