发明名称 一种利用2-DE技术筛选钝齿棒杆菌内源高表达启动子的方法
摘要 一种利用2-DE技术筛选钝齿棒杆菌内源高表达启动子的方法,属于蛋白质组学和基因工程领域。本发明首先通过2-DE技术结合质谱技术鉴定出钝齿棒杆菌胞内高表达蛋白点。克隆其编码基因启动子,分别命名为P-argC、P-argG、P-argF、P-ilvC和P-serA,替换穿梭载体pDXW-8上的tac启动子,并在其下游插入cat基因,分别转化大肠杆菌JM109和钝齿棒杆菌SYPA5-5,通过测定CAT的活性,各启动子在重组菌中的活性:P-argG>P-argF>P-ilvC>P-serA>P-argC。这是首次获得来自钝齿棒杆菌组成型高表达启动子,为钝齿棒杆菌高表达外源基因提供了有效的工具。
申请公布号 CN103074343B 申请公布日期 2015.10.14
申请号 CN201310043507.0 申请日期 2013.02.04
申请人 江南大学 发明人 饶志明;许正宏;张博慧;徐美娟
分类号 C12N15/113(2010.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12N15/77(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/15(2006.01)N 主分类号 C12N15/113(2010.01)I
代理机构 代理人
主权项 N‑乙酰‑γ‑谷氨酰胺磷酸脱氢酶基因启动子,其特征在于:序列如SEQ ID NO:1所示。
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