一种猪胃肠道内容物代谢组学提取方法

摘要

本发明公开了一种猪胃肠道内容物代谢组学提取方法，方法如下：称量解冻的胃肠道内容物1g，采用1M NaOH溶液和1M HCl溶液将pH值调整到8.0，然后称取0.1g混匀的内容物，加入0.1M磷酸盐缓冲液(pH值8.0)1mL，液氮速冻后，水浴锅中超声并解冻，置于组织破碎仪中(20Hz，30s)破碎，如此反复冻融、超声和破碎处理3个循环。最后，4℃，5 000rpm离心10min，取上清液0.6mL加入5mm核磁管备用。可检测代谢物51种，其中，氨基酸20种，短链脂肪酸7种，三羧酸循环代谢物5种，其他代谢物19种，整个提取过程仅需3h。谱峰漂移受pH值影响很小。因此，该方法不仅提高了代谢物的提取率，提高了核磁谱图的质量，而且简化了提取流程。

主权项

一种猪胃肠道内容物代谢组学提取方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)用1M NaOH溶液和1M HCl溶液将解冻的猪胃肠道内容物pH值调整到2.0—12.0；(2)取猪胃肠道内容物加入0.1M或1M的磷酸盐缓冲液中，猪胃肠道内容物与磷酸盐缓冲液的质量体积比为1:20至1:2，质量体积比的单位为g/mL，经液氮速冻后，于水浴锅中超声解冻，然后置于组织破碎仪中破碎；将破碎后的猪胃肠道内容物再重复液氮速冻、超声解冻、破碎仪破碎处理1—3次；(3)将经步骤(2)处理后的猪胃肠道内容物于4℃、12000rpm离心，取上清液，即为猪胃肠道内容物的提取物。