发明名称 一种基于克隆和常规测序鉴定肉制品材料来源的方法
摘要 本发明涉及分子生物学技术领域,公开了一种基于克隆和常规测序鉴定肉制品材料来源的方法,包含下述步骤:(1)提取待测基因组DNA;(2)设计并合成正向引物和反向引物;(3)对基因组DNA进行PCR扩增,对扩增产物检测并回收;(4)对PCR扩增产物进行TA克隆,得到阳性克隆,挑取单克隆进行测序;(5)对测序结果去除两端的载体序列,得到待测肉制品的COI序列信息,由此鉴定待测肉制品的材料来源。利用该方法可对肉制品的材料组成和来源进行鉴定,由于COI基因序列中碱基序列的差异能很好地区分物种,因此该方法对肉制品材料来源进行鉴定具有较高的准确性。
申请公布号 CN104975106A 申请公布日期 2015.10.14
申请号 CN201510470343.9 申请日期 2015.08.03
申请人 上海派森诺生物科技有限公司 发明人 孙子奎;高文学;丁方美;王峰;方婉
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 上海晨皓知识产权代理事务所(普通合伙) 31260 代理人 成丽杰
主权项 一种基于克隆和常规测序鉴定肉制品材料来源的方法,其特征在于,包含下述步骤:(1)提取待测肉制品的基因组DNA;(2)设计并合成SEQ ID NO:1所示的正向引物和SEQ ID NO:2所示的反向引物;(3)采用步骤(2)中所述的正向引物和反向引物,对步骤(1)中所提取的基因组DNA进行PCR扩增,然后对PCR扩增产物进行检测并回收;(4)对步骤(3)中回收得到的PCR扩增产物进行TA克隆,得到阳性克隆,然后挑取阳性单克隆进行测序;(5)对步骤(4)中测序的结果,去除两端的载体序列,得到待测肉制品的COI序列信息,由此鉴定待测肉制品的材料来源。
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