以多糖作为信号放大媒介体的核酸电化学生物分析方法

摘要

本发明公开了一种通过引入多糖类化合物来对痕量特异性寡核苷酸片段进行检测的高灵敏、高选择性核酸电化学生物分析方法。将固定在电极表面的肽核酸作为捕获探针，与待测寡核苷酸片段杂交后，利用过渡金属离子的配位化学作用，将多糖分子连接到电极表面；多糖分子中的邻位羟基被氧化成醛基后能将银离子还原成银纳米粒子而沉积在电极表面；通过电化学方法对银纳米粒子进行定量，可以实现对待测寡核苷酸片段的高灵敏检测。这种核酸电化学生物分析方法具有很强的选择性和很高的灵敏度，可用于分子诊断、临床医学、环境监测以及食品安全等领域中低含量核酸样品的检测。

主权项

一种以多糖作为信号放大媒介体的高灵敏核酸电化学生物分析方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将金电极表面打磨至镜面，清洗干净后，在水虎鱼酸中浸泡，清洗后，在稀硫酸中对电极表面进行电化学预处理，清洗干净后用氮气吹干；步骤二、将修饰有巯基末端的肽核酸的水溶液滴加到上述预处理过的金电极表面，进行反应，将残余的肽核酸清洗干净，用巯基己醇对电极表面进行封闭，封闭结束后冲洗干净，用氮气吹干；步骤三、将含待测寡核苷酸片段的溶液滴加到步骤二所得的电极表面，杂交反应结束后，将未参与杂交反应的寡核苷酸片段清洗干净，用氮气吹干；步骤四、将步骤三所得电极表面浸泡在含过渡金属离子的溶液中，反应完成后清洗干净，将多糖滴加到电极表面，反应结束后清洗干净，用氮气吹干；步骤五、将步骤四所得电极表面浸泡在强氧化性试剂中，反应结束后清洗干净，将银离子溶液滴加到电极表面,反应结束后清洗干净，用氮气吹干；步骤六、将步骤五所得电极表面沉积的银纳米粒子用电化学方法进行检测。