发明名称 | 一种无损伤提取脉红螺基因组DNA的方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种无损伤提取脉红螺基因组DNA的方法,首先用浸有75%酒精的棉球擦拭脉红螺的壳口和腹足用于消毒;将脉红螺放于盐度为50ppt的海水中5-8分钟后,再将其放入盐度为29-31ppt的海水中15-20分钟,待脉红螺腹足伸出时将其从海水中取出,用物理刺激的方法令脉红螺产生粘液;用1.5mL离心管沿壳口收集300-500μL粘液;收集到的脉红螺粘液采用常规的苯酚氯仿法提取DNA。实验证明,本发明具有对脉红螺个体无损伤、低成本、操作简单、提取的基因组DNA质量高等特点。脉红螺无损伤DNA提取不仅可以为脉红螺种质资源保护提供有利的辅助手段,而且可为脉红螺的分子辅助育种等研究提供有力的技术支持。 | ||
申请公布号 | CN104975001A | 申请公布日期 | 2015.10.14 |
申请号 | CN201510414754.6 | 申请日期 | 2015.07.15 |
申请人 | 中国海洋大学 | 发明人 | 于红;杨智鹏;李琪;于瑞海;李浩浩 |
分类号 | C12N15/10(2006.01)I | 主分类号 | C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人 | 王铎 |
主权项 | 一种无损伤提取脉红螺基因组DNA的方法,其特征在于包括如下步骤:a. 首先用浸有75%酒精的棉球擦拭脉红螺的壳口和腹足用于消毒;b. 将脉红螺放于盐度为50ppt的海水中5‑8分钟;c. 将脉红螺从50ppt的海水中取出,放入盐度为29‑31ppt的海水中15‑20分钟,待脉红螺腹足伸出时将其从海水中取出,用物理刺激的方法使脉红螺产生粘液;d. 收集脉红螺产生的粘液;e. 在收集到的脉红螺粘液加入抽提缓冲液400 μL,蛋白酶K10 μL,混匀之后,37℃消化10‑12 h,采用常规的苯酚氯仿法即可提取到脉红螺基因组DNA。 | ||
地址 | 266100 山东省青岛市崂山区松岭路238号 |