一种利那洛肽的固相合成方法

摘要

本发明公开了一种利那洛肽的固相合成方法，属于生物化学技术领域，该方法包括如下步骤：(1)利那洛肽树脂的制备；(2)对步骤(1)得到的利那洛肽线性肽树脂进行切割，得到了含有Cys(Acm)和Cys(tBu)的保护基线性肽；(3)氧化形成第一对二硫键，得到单二硫环肽；(4)脱除单二硫环肽中Acm保护基，得到双二硫环肽；(5)脱除双二硫环肽中的tBu保护基，得到三二硫环肽；(6)将得到的三二硫环肽经HPLC纯化，冻干得到利那洛肽。本发明工艺具有反应操作简便、后处理容易、成本低、收率高等特点，具有可观的经济实用价值，同时在多肽药物设计合成领域具有广泛的应用前景。

主权项

一种利那洛肽的固相合成方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)利那洛肽树脂的制备：Fmoc‑Tyr(tBu)‑OH和载体树脂反应，获得Fmoc‑Tyr(tBu)‑树脂；以Fmoc‑Tyr(tBu)‑树脂为固相载体，采用逐一偶联的方式从C端到N端依次偶联13个具有Fmoc保护基团的氨基酸，获得利那洛肽线性肽树脂，其中，形成二硫键的三组Cys分别连接Trt、Acm或tBu保护基，同组的Cys连接相同保护基，不同组的Cys连接不同的保护基；(2)将步骤(1)得到的利那洛肽线性肽树脂进行切割，脱去除Cys(Acm)和Cys(tBu)外的所有氨基酸的侧链保护基，得到了含有Cys(Acm)和Cys(tBu)的保护基线性肽；(3)氧化步骤(2)得到的线性肽形成第一对二硫键，得到单二硫环肽；(4)脱除步骤(3)得到的单二硫环肽中Cys(Acm)中Acm保护基，同时形成第二对二硫键，得到双二硫环肽；(5)脱除步骤(4)得到的双二硫环肽中Cys(tBu)中的tBu保护基，同时形成第三对二硫键，得到三二硫环肽；(6)步骤(5)得到的三二硫环肽经HPLC纯化，冻干得到利那洛肽。