一种表面等离子体共振免疫传感芯片及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及生物芯片领域，具体涉及表面等离子体共振免疫传感芯片及其制备方法与应用。所述的表面等离子体共振免疫传感芯片是通过在固相载体固定虾原肌球蛋白、虾原肌球蛋白单克隆抗体腹水或虾原肌球蛋白单克隆抗体作为生物探针，利用金膜产生表面等离子体共振响应，利用自组装单分子层技术在金膜表面修饰巯基，芯片活化后在生物芯片上固定探针得到的；该生物芯片可应用于虾原肌球蛋白单克隆抗体或检测虾原肌球蛋白单克隆抗体腹水的检测和过敏原（虾原肌球蛋白）的检测，具有操作简便、快速、灵敏度高、不需要标记、成本低、设备简单、对环境无污染等优点，有望实现大量样品的现场实时检测。

主权项

一种表面等离子体共振免疫传感芯片的制备方法，其特征在于包含如下步骤：(1)在玻璃基底上沉积厚度为40～60nm的金膜作为表面等离子体共振免疫传感芯片的固相载体；(2)在培养皿中注入含有HS(CH₂)₁₀COOH和HS(CH₂)₆OH的乙醇溶液，对金膜表面进行化学修饰；然后注入PBS缓冲液清洗，洗掉未结合物质；氮气吹干；(3)将上述固相载体固定在SPR检测仪上；(4)流通池中通入PBS缓冲液清洗，待基线稳定后加入N‑羟基琥珀酰亚胺和N‑乙基‑N’‑(二甲氨基丙基)碳二亚胺的混合液活化芯片；然后通入PBS缓冲液清洗；(5)在生物芯片表面固定虾原肌球蛋白、虾原肌球蛋白单克隆抗体腹水或虾原肌球蛋白单克隆抗体，记录表面等离子体共振角的变化，监测生物探针固定的过程,当共振角不再升高时，探针固定过程结束；然后通入PBS缓冲液清洗；(6)加入乙醇胺溶液封闭灭活剩余的酯键；然后通入PBS缓冲液清洗，得到表面等离子体共振免疫传感芯片；步骤(4)中所述的N‑羟基琥珀酰亚胺的终浓度为0.05mol/L；所述的N‑乙基‑N’‑(二甲氨基丙基)碳二亚胺的终浓度为0.05mol/L；步骤(5)中所述的虾原肌球蛋白的浓度为0.105mg/mL；所述的虾原肌球蛋白单克隆抗体腹水是将效价为15000的虾原肌球蛋白单克隆抗体腹水稀释100倍得到的；所述的虾原肌球蛋白单克隆抗体的浓度为0.0042mg/mL。