一种水蛭素冻干粉针剂的制备方法

摘要

本发明公开一种水蛭素冻干粉针剂的制备方法，包括粉碎、制浆、超滤、阴阳离子柱层析除杂、浓缩脱盐、干燥等步骤。本发明采用超滤、阴离子交换、阳离子交换柱层析法进行除杂，再用透析袋浓缩法去除提取过程中产生的盐类物质，指水蛭素的纯度大大提高。本发明的水蛭素制备方法操作性、实用性强，有利于产业化推广。

主权项

一种水蛭素冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(A)取水蛭，加入注射用水，洗去杂质后破碎，制成匀浆；将匀浆分装于有盖容器中，于‑30℃冰柜冻结20‑24小时，再用乙醇解冻，再次冻结，反复冻、融3‑5次，最后一次解冻后，加氯化钠溶液，搅拌，再用冷冻离心机离心沉淀，吸取上清液备用；(B)将上清液进行超滤，超滤至原溶液体积的1/3‑1/2时，加水至原体积，反复操作3‑5次，合并透过液，20℃下浓缩至相对密度为1.05‑1.10的溶液；(C)将浓缩的过滤液用缓冲液调PH值为5.0‑7.0，离子强度为0.01mol/l 通过阳离子交换柱，用缓冲液洗46倍的柱体积洗脱，收集洗脱液，再用缓冲液调PH值为5.0‑7.0通过阴离子交换柱，分别用PH值为7.3‑7.5、7.1‑7.3的缓冲液各洗1倍柱体积，洗脱液弃去，最后用PH值为7.1‑7.3的缓冲液加入0.01mol/l的氯化钠进行洗脱，收集洗脱液，洗脱至紫外检测器检测不到吸收为止；(D)洗脱液浓缩脱盐，得到水蛭素半成品；(E)将水蛭素半成品加或不加药用辅料，用注射用水调整浓度后，分装到西林瓶中，进行冷冻干燥，轧盖，检测，得到水蛭素冻干粉针剂。