一种采用超滤法辅助硫酸铵盐析提取乳过氧化物酶的方法

摘要

本发明公开了一种采用超滤法辅助硫酸铵盐析提取乳过氧化物酶的方法，以牛乳清为原料,采用硫酸铵盐析方法分离牛乳清中乳过氧化物酶，具体方法为向乳清中添加一定饱和度的硫酸铵，经过一段时间使乳过氧化物酶沉淀，离心使乳过氧化物酶完全沉淀，收集沉淀即获得乳过氧化物酶，将沉淀复溶，经超滤膜去除小的杂蛋白，进一步纯化乳过氧化物酶，通过透析袋脱盐处理，然后冷冻干燥，从而制备出高活性的可用于天然食品添加剂的乳过氧化物酶产品。采用本发明可以直接制得天然的抗菌介质乳过氧化物酶制品，也可以将其作为天然防腐剂直接加入到食品或牙膏等日常用品中。

主权项

一种采用超滤法辅助硫酸铵盐析提取乳过氧化物酶的方法，其特征在于包含以下步骤：(1)硫酸铵盐析法分级提取乳过氧化物酶：除去新鲜的牛乳中的脂肪和酪蛋白后得到乳清，在室温条件下，向乳清中添加25‑85％饱和度的硫酸铵，离心，去除沉淀，置于搅拌器上不断搅拌使硫酸铵充分溶解，调节体系pH到5.5‑8.5，放置2‑10h使乳过氧化物酶完全沉淀，4℃5000‑10000r/min离心20min到沉淀即为乳过氧化物酶制品；(2)超滤：将步骤(1)中得到的沉淀使用适量去离子水复溶用超滤膜进行超滤分离，以除去杂蛋白，收集截留溶液；(3)脱盐处理：将步骤(2)收集的截留溶液装入透析袋内进行脱盐；(4)干燥：将步骤(3)脱盐溶液冷冻干燥即制得乳过氧化物酶粗制品。