主权项 |
一种B型肝炎病毒检测方法,包含:一增幅步骤,以聚合酶连锁反应增幅一核苷酸片段,而获得一聚合酶连锁反应片段,该聚合酶连锁反应系利用如SEQ ID NOS:1及2所示之引子对进行增幅,该引子对之5’端皆标示一生物素,使该聚合酶连锁反应片段之两端分别标示该生物素;一磁珠步骤,准备复数个磁珠,该复数个磁珠之表面系具有链球菌卵白素,且该链球菌卵白素与该生物素之间具有专一性地亲合关系;一复合物形成步骤,混合该聚合酶连锁反应片段以及该复数个磁珠,使该聚合酶连锁反应片段一端之生物素与该磁珠之链球菌卵白素相互反应、进而结合,该聚合酶连锁反应片段另一端之生物素则呈一端游离,以形成聚合酶连锁反应片段-磁珠之复合物;一阻断及洗涤步骤,系利用一阻断缓冲液及洗涤缓冲液除去未与该磁珠结合之聚合酶连锁反应片段,其中,该阻断缓冲液系用以悬浮该聚合酶连锁反应片段-磁珠之复合物,而该洗涤缓冲液则系用以清洗该聚合酶连锁反应片段-磁珠之复合物;以及一呈色步骤,提供一呈色剂及一酵素受质,该呈色剂系标示一卵白素,使该呈色剂与该聚合酶连锁反应片段-磁珠之复合物反应,而形成呈色剂-聚合酶连锁反应片段-磁珠之复合物,再加入酵素受质进一步反应,
以透过分析该呈色剂而得检测结果;其中,该呈色剂系藉由该卵白素而结合于该聚合酶连锁反应片段另一端之生物素,该卵白素与该生物素之间具有专一性地亲合关系,且不等同于该链球菌卵白素。
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