一种用于TAFI含量体外检测的试剂盒及其体外检测方法

摘要

本发明涉及一种检测凝血酶激活的纤溶抑制物（thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor，简称TAFI）含量的新方法，特别是TAFI含量的体外检测方法。试剂盒由TAFI快速检测试纸、样本稀释液组成，其中TAFI快速检测试纸由PVC板条、样品垫、金垫、NC膜和吸水纸组成；样本稀释液为磷酸盐缓冲液（PH7.0）。所述NC膜由T线和C线组成。酸盐缓冲液配置方法为：取磷酸二氢钾0.68g加0.1mol/L NaOH溶液29.1ml,用水稀释至100ml。所述试剂盒示踪标志物为胶体金。

主权项

一种用于TAFI含量体外检测的试剂盒，其特征在于：由TAFI快速检测试纸、样本稀释液组成，其中TAFI快速检测试纸由PVC板条、样品垫、金垫、NC膜和吸水纸组成；样本稀释液为磷酸盐缓冲液pH6.8‑7.4；TAFI快速检测试纸的制备方法为：a.金垫的制备1)取1ml胶体金加2μl的0.2M K₂CO₃混匀后，再加入20μg浓度为3.68mg/ml的4E7抗体，混匀静置5‑20min，加5‑20μl BSA、PEG或者Casein‑Na封闭，再次混匀静置5‑20min，离心5‑10min 9000r/min，弃上清，沉淀用30‑100μl复溶液复溶；2)取1ml胶体金，加6μl的0.2M K₂CO₃，混合后再加入25μg浓度为10mg/ml的兔IgG,混匀静置10min，加5‑20μl 20％的BSA、PEG或者Casein‑Na溶液，混匀静置5‑20min，离心5‑10min 9000r/min，弃上清，沉淀用50μl复溶液复溶；3)喷金：将4E7抗体和兔IgG各复溶的50μl两者1:1混合至100μl，混合后的样本通过加压的方式，以雾状均匀喷在玻璃纤维素膜上，45℃烘干0.5h‑2h，密封干燥保存即为金垫；b.NC膜的制备包被工艺：将3B1抗体用PBS稀释至0.3‑0.8mg/ml，羊抗兔用PBS稀释至0.5‑1.5mg/ml分别固定在NC膜上T线和C线位置上，包被后室温晾干后，密封干燥保存待用；c.安装将样品垫、金垫、PVC板、固定好抗体的NC膜、吸水纸组装成试纸条即可，所述样品垫采用玻璃纤维素膜；复溶液为Tris 0.36％；pvp 40 0.5％；BSA 0.2％；PEG20000 0.1％；10％蔗糖2％；TWEEN 20 0.6％；Casein‑Na 0.6％；叠氮钠0.5‰。