木霉菌分生孢子粉尘剂的制备方法及其应用

摘要

本发明公开一种木霉菌分生孢子粉尘剂的生产方法及其应用，利用从蔬菜叶表分离获得的木霉菌，纯化后转移至PDA试管斜面内作母菌种，通过调节温度、pH值、供氧量等技术参数使其产生分生孢子液，再采用固体发酵获得大量耐干燥分生孢子，将分生孢子粉碎后与超细度硅藻土混合制成木霉菌分生孢子粉尘剂，该粉尘剂采用喷粉的方法用于保护地蔬菜生产，对由灰霉病菌、叶霉病菌等病原菌引起的叶部病害防效达60－85％。

主权项

1.一种木霉菌分生孢子粉尘剂的生产方法，其特征在于包括如下具体步骤：1)斜面母菌种制备：取蔬菜叶片5-10克，加无菌水50-100毫升，经振荡后加水成1000-10000倍稀释液；取马铃薯150-200克，葡萄糖15-20克，孟加拉红0.04-0.07克、硫酸链霉素0.03-0.05克，琼脂17-20克，水1000毫升，配制成母菌种培养基；取稀释液与菌种培养基以1∶9混合后倒入培养皿内制成培养基平板，在25-28℃下培养48小时，经分离获得木霉菌菌株，经纯化后转移至试管斜面内作斜面母菌种；2)二级菌种制备：取马铃薯150-200克，葡萄糖或蔗糖15-20克，磷酸二氢钾1-2克，硫酸镁0.5-1克，水1000毫升，配制成二级发酵培养液，调pH值为6-8，分装在250-1000毫升三角瓶中，装液量为100-300毫升，在121℃下灭菌20-40分钟，在无菌室内将斜面母菌种转入摇瓶，摇床转速为150-200转/分，发酵温度28-31℃，发酵时间为3-5天，得到二级菌种；3)固体发酵：所采用的固体发酵培养基成分以重量百分比计算为：培养料为麦麸或秸秆粉或玉米渣70-80％、稻壳20-30％，水为培养料的50-100％，制作方法是将培养料与水充分混合后制成固体培养基装入耐高温塑料袋或发酵瓶中，在121℃下灭菌40-60分钟，接入二级菌种，接菌量为固体培养基的5-10％，发酵温度为25-30℃，接菌后第3-5天翻动一次，发酵时间7-10天，至培养料变成绿色即木霉菌分生孢子；4)木霉菌分生孢子粉尘剂的生产：将满载木霉菌分生孢子的固体培养料经常温干燥后，用万能粉碎机粉碎成木霉菌分生孢子母粉，按重量百分比取5-10％分生孢子母粉、5-10％300-350目轻质碳酸钙、80-90％300-350目硅藻土充分混合后制成分生孢子粉尘剂。