一种辅酶Q10的生产发酵工艺

摘要

本发明公开了一种辅酶Q10的生产发酵工艺，在保持辅酶Q10发酵品质的前提下，根据辅酶Q10产生菌代谢过程中主要副产物5-脱甲氧基辅酶Q10的合成速率及其含量变化，反馈调节代谢初始反应，并对合成代谢起限速作用，从而对细胞内目的产物辅酶Q10的积累进行反馈调节，通过对发酵配方中主要底物浓度的优化，及在发酵过程中对搅拌转速的优化调控，使辅酶Q10的发酵水平有较大幅度的提升，辅酶Q10发酵水平可提高到3000u/ml以上，放罐最佳时机的确定提高了细胞内辅酶Q10生产的时间利用率，降低了发酵成本，使发酵原材料消耗大大降低。

主权项

1、一种辅酶Q10的生产发酵工艺，其特征在于它包括以下步骤：(1)菌种传代：荚膜红假单胞菌(Rhodopseudomonas capsulatus)ATCC 11166采用斜面传代，培养基为肉汤培养基，培养温度为30℃，培养时间为96小时，至长出淡黄色的菌落，菌落长度为1～1.5mm；(2)菌种扩大培养：将步骤(1)的菌种接入已灭菌的种子罐，进行两级培养，在无光照的条件下，控制温度为30～35℃，搅拌100～500rpm，压力0.02～0.05Mpa，培养20～24小时；(3)发酵补料培养：在无菌条件下，将步骤(2)培养出的种子液接入发酵罐，在无光照的条件下，控制发酵温度30～35℃，搅拌100～300rpm，压力0.02～0.05Mpa，培养时间90～110小时，在发酵过程进行两次补入葡萄糖溶液、氨水和磷酸二氢钾溶液，第一次补料时间在20～40小时，第二次补料时间在45～65小时，补料体积分别为发酵罐计料体积的2～10％，发酵过程中，通过检测发酵液中主要副产物5-脱甲氧基辅酶Q10和目的产物辅酶Q10的含量，补入葡萄糖溶液，使得发酵过程总糖和还原糖的含量控制在0.5～1.5％之间，补入氨水使得发酵过程pH控制在6.5～7.0之间，氨基氮含量控制在1.0～5.0mg/ml之间，补入磷酸二氢钾溶液使得溶磷控制在50～500ug/ml之间，当发酵液中主要副产物5-脱甲氧基辅酶Q10与目的产物辅酶Q10的含量比值低于10％时放罐；其中步骤(2)中种子罐的培养基配方，按质量比计为：硫酸铵 0.10～0.50％硫酸镁 0.10～0.50％磷酸二氢钾 0.02～0.10％葡萄糖 0.30～1.00％玉米浆粉 0.02～0.10％碳酸钙 0.35～0.90％维生素B1 0.001～0.01％水 97～99％pH值 6.8培养基灭菌温度为118～121℃，时间为30分钟；其中步骤(3)中发酵罐的培养基配方，按质量比计为葡萄糖 0.50～1.50％玉米浆粉 0.20～0.80％硫酸铵 0.10～0.50％磷酸二氢钾 0.05～0.30％硫酸镁 0.50～2.00％维生素B1 0.001～0.01％水 97～99％pH值 6.8培养基灭菌温度为118～121℃，时间为30分钟。