| 摘要 |
1. Способ увеличения стабильности и единообразия пегилированного полипептида ГКСФ, имеющего, по меньшей мере, одно звено ПЭГ, присоединенное к ε-аминогруппе остатка лизина или N-концевой аминогруппе, и, по меньшей мере, одно звено ПЭГ, присоединенное к гидроксильной группе, включающий подвергание полипептида действию повышенного pH выше 8,0 в течение периода времени, достаточного для удаления звеньев ПЭГ, присоединенных к гидроксильной группе, и понижения pH до около 8,0 или ниже. ! 2. Способ по п.1, где повышенный pH находится в интервале от приблизительно 8,5 до приблизительно 10,5. ! 3. Способ по п.2, где повышенный pH находится в интервале от приблизительно 9,0 до приблизительно 10,0. ! 4. Способ по п.3, где повышенный pH находится в интервале от приблизительно 9,2 до приблизительно 9,8, например, при приблизительно 9,5. ! 5. Способ по п.1, где полипептид подвергают действию повышенного pH в течение периода времени от приблизительно 2 до приблизительно 100 ч. ! 6. Способ по п.5, где полипептид подвергают действию повышенного pH в течение периода времени от приблизительно 4 до приблизительно 72 ч. ! 7. Способ по п.6, где полипептид подвергают действию повышенного pH в течение периода времени от приблизительно 8 до приблизительно 48 ч. ! 8. Способ по п.7, где полипептид подвергают действию повышенного pH в течение периода времени от приблизительно 12 до приблизительно 30 ч. ! 9. Способ по п.1, дополнительно включающий подвергание полипептида при пониженном pH, по меньшей мере, одному этапу хроматографической очистки. ! 10. Способ по п.9, где этап хроматографической очистки является ионообменной хроматографией. ! 11. Способ по п.10, где pH понижают ниже приблизительно 7,0 и эт |
