人鼻咽癌辐射耐受细胞株的建立及机制初探

摘要

本发明涉及一种人鼻咽癌辐射抗拒细胞株CNE2R的建立，选择人鼻咽癌细胞株CNE2作为亲代细胞，选择X射线的终剂量为600Gy作为大剂量冲击用量，以反复大剂量冲击方式间歇用药，建立CNE2R细胞，其生长速度较原细胞株CNE2慢，且在进入指数增长期之前的潜伏期更长，CNE2的倍增时间是21.7h，CNE2R的倍增时间是20.5h，其倍增时间较CNE2延长；CNE2和CNE2R的放射生物学参数α值分别为0.138和0.065(p＜0.01)，放射生物学参数β值分别为0.169和0.141(p＜0.01)，2Gy存活分数SF2值为0.359和0.574(p＜0.01)，CNE2R的放射抗拒性增加。

主权项

1.一种人鼻咽癌辐射耐受细胞株的建立，其特征在于：选用爬坡式大剂量X线诱导照射，建立同起源和同遗传背景的辐射耐受NPC细胞株CNE2R，按以下步骤进行：(1)射线：选用X线；(2)剂量：采用X线剂量分别为200Gy、400Gy、600Gy作爬坡式大剂量X线诱导；(3)亲代细胞培养：人鼻咽癌细胞株CNE2细胞生长于含10％新生牛血清的RPMI-1640培养液中，置于5％CO2、37℃培养箱中培养；(4)人鼻咽癌辐射耐受细胞株诱导：取处于对数生长期CNE2细胞，0.25％的胰酶消化后计数，以1.0×104/cm2细胞种植培养瓶，种植完毕用封口膜封好培养瓶口，采用北京医用X线机厂生产的深部X线机，照射条件为电压210kV、电流12mA，滤过板为0.25Cu、照射野大小为10cm×15cm，焦皮距为40cm，剂量率为101.38cGy/min，半价层为0.52Cu进行照射，照射后的细胞置于37℃，5％CO2培养箱中培养，每24h换液一次，待细胞状态稳定后再进行第二次冲击，如此反复作用，200Gy、400Gy、600Gy各冲击照射3次，共9次，历时1年建成人鼻咽癌辐射耐受细胞株CNE2R。