多基因聚合辅助载体pCR35STnos的构建方法及其应用

摘要

本发明涉及多基因聚合辅助载体pCR35STnos的构建方法及其应用。辅助载体pCR35STnos的技术特征是含有“5′-X-启动子-MCS-终止子-Y-X-3′”表达盒，其中X与Y互为同尾酶，MCS为多克隆位点。辅助载体pCR35STnos的应用特征是首先将各目的基因分别亚克隆到该辅助载体的MCS上，获得相应基因表达盒。然后用同尾酶X酶切辅助载体获得基因表达盒1，并重组到带有基因表达盒2的辅助载体的Y同尾酶酶切位点上，获得含有两个基因表达盒的辅助载体。同理可以将多个基因表达盒聚合到该辅助载体上。最后用X或其它限制性内切酶酶切下多基因表达盒，重组到表达载体中，获得多基因表达载体。

主权项

1.本发明涉及一种多基因聚合辅助载体pCR35STnos的构建方法及其应用，其特征在于多基因聚合辅助载体pCR35STnos上待建基因表达盒的两端含有一对同尾酶的特异识别序列结构，即“5′-同尾酶X-启动子-MCS-终止子-同尾酶Y-同尾酶X-3′”，其中X与Y为任意一对同尾酶，启动子和终止子分别为任意所需启动子和终止子，MCS为多克隆位点。