发明名称 |
诺如病毒环介导等温扩增快速检测方法 |
摘要 |
本发明涉及一种G II型诺如病毒环介导等温扩增快速检测方法。其中的试剂包括环介导等温扩增反应液、Bst DNA聚合酶、显色剂;所述的反应液含有反应缓冲液、dNTP、硫酸镁、上游内引物5-CGGGCTCCAGAGCCATAACCT-ACGCCAACCCATCTGATG-3、下游内引物5-GTGGCGGGCCAACAAAACGTA-CACTGTGAACTCTCCACCAG-3、上游外引物5-GTGAATGAAGATGGCGTCGA-3、下游外引物5-CTGGAGCGTTTCTAGGGGA-3和甜菜碱;检测G II型诺如病毒的方法包括病毒RNA的提取、G II型诺如病毒的环介导等温扩增、显色检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高而且成本低。 |
申请公布号 |
CN101403014A |
申请公布日期 |
2009.04.08 |
申请号 |
CN200810157904.X |
申请日期 |
2008.10.15 |
申请人 |
山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
发明人 |
雷质文;贺楠;刘云国;张健;祝素珍;姜英辉;李正义;房保海;唐静;贾俊涛;赵丽青;马维兴 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
青岛海昊知识产权事务所有限公司 |
代理人 |
张中南 |
主权项 |
1.环介导等温扩增检测诺如病毒的试剂,其特征是该试剂包括(1)-(5):(1)环介导等温扩增反应液:包括10×Thermopol反应缓冲液、1.0-1.4mmol/L dNTP、4-8mmol/L硫酸镁、0.8-1.6μmol/L上游引内物、0.8-1.6μmol/L下游内引物、0.2-0.3μmol/L上游外引物、0.2-0.3μmol/L下游外引物和1-1.5mol/L甜菜碱;其中10×Thermopol反应缓冲液含有200mmol/L pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸、100mmol/L氯化钾、100mmol/L硫酸铵、20mmol/L硫酸镁和1%曲拉通X-100;其中,上游内引物:5-CGGGCTCCAGAGCCATAACCT-ACGCCAACCCATCTGATG-3;下游内引物:5-GTGGCGGGCCAACAAAACGTA-CACTGTGAACTCTCCACCAG-3;上游外引物:5-GTGAATGAAGATGGCGTCGA-3;下游外引物:5-CTGGAGCGTTTCTAGGGGA-3;(2)UNG酶:1U/μL;(3)Bst DNA聚合酶:8U/μL;(4)ReverTra Ace:100U/μL;(5)显色剂:为10%的荧光染料SYBR GREEN I或者DNAGreen。 |
地址 |
266002山东省青岛市瞿塘峡路70号 |