K-ras寡核苷酸微型阵列及用其检测K-ras突变的方法

摘要

由于本发明所述K-ras寡核苷酸微型阵列能够通过将竞争性DNA杂交方法应用到点样在一个固体矩阵上的寡核苷酸而检测K-ras突变，而该方法不同于以前报道过的突变检测方法，这样就使得分析更加精确，而且可以减少实验成本和时间。因此，本发明所述K-ras寡核苷酸微型阵列可被用于检测K-ras突变、解释信号传导机制和有关K-ras基因的肿瘤发生的研究。再则，由于本发明所述微型阵列可被用于有突变热点区域如K-ras的其他基因，该微型阵列具有广泛的应用范围。

主权项

一种使用固定在固体矩阵表面的由SEQ ID NO：1至20的核苷酸序列的多种寡核苷酸组成的K ras寡核苷酸微型阵列检测K ras突变的解释信号传导机制的方法，包括1)制备使用不同荧光染料标记的三个不同DNA样品；2)通过将标记的DNA样品混合物滴于该微型阵列表面一个寡核苷酸点样点内，使该标记的DNA样品在有限数量的点样的寡核苷酸的杂交反应中互相竞争，从而使步骤1)中标记的DNA样品在K ras寡核苷酸微型阵列上与寡核苷酸点样点进行竞争性DNA杂交；3)冲洗反应后的微型阵列，去除未结合的样品DNA；4)利用荧光读数器检测特异的寡核苷酸点样点的杂交形式；和5)检查是否有基因突变的存在；其中所述的DNA样品是从目标病人得到的肿瘤样品或血样。