一种酶法降解壳聚糖生产壳寡糖的方法

摘要

本发明提出了一种降解壳聚糖生产壳寡糖的方法。其工艺过程为：利用能高效表达壳聚糖酶芽孢杆菌TQK，经发酵培养和分离纯化除去杂质，得到酶活达718u/ml的TQK酶液，将TQK酶液按酶底之比1∶10加入到以壳聚糖溶液为底物浓度为10-20％的降解液中进行酶解，酶解反应条件为：搅拌200-300转/分，pH 4～5.5，温度45～52℃，时间4～6小时；然后经离心分离；絮凝、澄清、过滤处理；离子交换处理；超滤分级处理；真空浓缩处理；喷雾干燥处理；制出壳寡糖成品。本发明酶解底物浓度高达15-20％，酶解时间仅4～6小时，收得率高、能耗低，污染小，能够快速、低耗、大量生产平均分子量为D1500的窄分子量分布壳寡糖。

主权项

一种酶法降解壳聚糖生产壳寡糖的方法，其特征在于其工艺过程为：1)、利用能高效表达壳聚糖酶的芽孢杆菌TQK，经发酵培养和分离纯化除去杂质，得到TQK酶液，测酶活达718u/ml，在0～4℃的低温下贮存备用；所述的芽孢杆菌TQK为2007年8月14日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC No：M207129的芽孢杆菌TQK；2)、配制壳聚糖溶液：底物浓度按15 20％配制，加入2％醋酸溶液，调节pH值，按酶底之比1∶10加入TQK酶液；3)、酶解反应，搅拌200 300转/分，pH4～5.5，温度45～52℃，时间4～6小时；用GPC仪监测，取样测定反应物粘度控制在8 10.0mpa.s时，停止酶解反应；4)、离心分离，将酶解物离心去杂；5)、絮凝、澄清、过滤处理，6)、离子交换处理；7)、超滤分级处理；8)、真空浓缩处理9)、喷雾干燥处理，出壳寡糖成品。