即时检测微生物之方法

摘要

本发明系提供一种监测特定微生物在环境中分布的方法，亦可监测废污水处理程序中微生物生态变化与水质检测的方法，主要系以尾端修饰限制片段长度多形性(terminal restriction fragment length polymorphism; T-RFLP)与特定微生物之T-RFLP基因库之互相搭配，以达到立即且快速监测与检测之目的。

主权项

一种监测及控制废污水处理程序中脱硝菌和硝化菌生态变化之方法，其包括：(A)自废污水处理程序之废污水中以一时间序列收集复数含有脱硝菌和硝化菌之微生物DNA样品；(B)复制该等样品中之脱硝菌功能性基因和该硝化菌基因之DNA；(C)将经复制之脱硝菌功能性基因和该硝化菌基因之DNA进行尾端限制片段长度多形性(T-RFLP)分析；及(D)根据该等经复制之脱硝菌功能性基因和该硝化菌基因之DNA的尾端限制片段长度多形性(T-RFLP)分析结果判定废污水中脱硝菌或硝化菌之生态变化，其中当脱硝菌功能性基因之DNA增加，即进流含硝酸氮废污水至废污水处理程序中；以及当硝化菌基因之DNA增加，即进流含氨氮废污水至废污水处理程序中。如申请专利范围第1项之方法，其中废污水处理程序系高温厌氧/无氧脱硝/好氧硝化三段式生物程序，根据硝化菌基因之DNA的尾端限制片段长度多形性分析结果，进流含氨氧化菌或亚硝酸氧化菌之废污水至废污水处理程序中。如申请专利范围第1项之方法，其中该硝化菌系选自包含氨氧化菌与亚硝酸氧化菌之群组。如申请专利范围第1项之方法，其中该功能性基因系为nirS。如申请专利范围第1或2项之方法，其中该硝化菌基因系指硝化菌之16S rDNA。如申请专利范围第1之方法，其中尾端限制片段长度多形性(T-RFLP)使用之引子于5’端上带有一萤光物质。如申请专利范围第1项之方法，其中尾端限制片段长度多形性(T-RFLP)所使用之限制酶为i>Msp/i>I。如申请专利范围第1或7项之方法，经由限制酶切成不同片段大小后，将该不同片段大小进行电泳分离且侦测其萤光强度。一种废污水水质检测的方法，其包括：(A)以一定时间序列从废污水中收集复数含有脱硝菌和硝化菌之微生物DNA样品以及进行水质分析；(B)复制该等样品中之脱硝菌功能性基因和该硝化菌基因之DNA；(C)将经过复制之脱硝菌功能性基因和该硝化菌基因之DNA进行尾端限制片段长度多形性(T-RFLP)分析；及(D)根据尾端限制片段长度多形性(T-RFLP)分析结果判定废污水中脱硝菌或硝化菌之生态变化，并与水质分析结果相对应，其中该水质分析系有机负荷、硝酸氮负荷或氨氮负荷。如申请专利范围第9项之方法，其中该硝化菌系选自包含氨氧化菌与亚硝酸氧化菌之群组。如申请专利范围第9项之方法，其中该功能性基因系为nirS。如申请专利范围第9或10项之方法，其中该硝化菌之基因系指硝化菌之16SrDNA。如申请专利范围第9之方法，其中尾端限制片段长度多形性(T-RFLP)使用之引子于5’端上带有一萤光物质。如申请专利范围第9项之方法，其中尾端限制片段长度多形性(T-RFLP)所使用之限制酶为i>Msp/i>I。如申请专利范围第9或14项之方法，其中经由限制酶切成不同片段大小后，将该不同片段大小进行电泳分离且侦测其萤光强度。