一种刚果红法测定谷物β-葡聚糖含量的方法

摘要

本发明涉及一种刚果红比色法测定谷物β-葡聚糖含量的方法。包括以下步骤：提取谷物中的β-葡聚糖、配制标准β-葡聚糖溶液、配制待测β-葡聚糖提取物溶液、配制刚果红溶液、制作标准曲线、测定待测液吸光度、根据标准曲线，计算提取物中β-葡聚糖含量。本发明简单有效，所需仪器十分普遍，只需要普通可见分光光度计即可，刚果红试剂便宜易得，适用范围广。

主权项

一种刚果红法测定谷物β‑葡聚糖含量的方法，其特征在于：所述方法的步骤如下：（1）提取谷物中β‑葡聚糖，获得待测β‑葡聚糖提取物；（2）取标准β‑葡聚糖，加去离子水于60‑100 °C水浴溶解1‑3 h，然后定容，使之浓度为0.1 mg/mL，得标准β‑葡聚糖溶液；（3）待测β‑葡聚糖提取物溶液的配制方法同标准β‑葡聚糖溶液的配制；（4） 取刚果红，用0.05‑0.2 mol/L、pH 6‑8的磷酸盐或碳酸盐缓冲液溶解并定容，得15‑120 µg/mL的刚果红溶液；（5）准确移取标准β‑葡聚糖溶液0‑1.2 mL置于不同的试管中，分别向每支试管中加入刚果红溶液，使β‑葡聚糖最终浓度范围为0‑20 µg/mL，刚果红最终浓度为10‑80 µg/mL，立即振荡10‑60 s，静置20‑60 min后于550 nm处测定吸光度，测定时以相同浓度的刚果红溶液为空白，每次测试至少做3次平行实验，然后以标准β‑葡聚糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制β‑葡聚糖标准曲线，得到回归方程；（6）移取待测β‑葡聚糖提取物溶液，加入刚果红溶液立即振荡10‑60 s，静置20‑60 min后于550 nm处测定吸光度，测定时以相同浓度的刚果红溶液为空白；（7）通过标准曲线及回归方程，计算得到待测β‑葡聚糖提取物中β‑葡聚糖含量。