发明名称 包埋-交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体用于大豆毛油脱胶的方法
摘要 包埋-交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体用于大豆油脱胶的方法,本发明涉及用包埋-交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体对大豆毛油进行脱胶的方法。选择包埋-交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体进行脱胶,是为了解决实际生产中酶反应条件不易控制而导致酶失活以及酶法脱胶中磷脂酶成本高的问题。包埋-交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体用于大豆油脱胶的方法通过以下步骤实现:一、包埋-交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体的制备;二、大豆毛油前期处理;三、向油中添加包埋-交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体;四、搅拌后离心,即实现用包埋-交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体对大豆毛油进行脱胶的工艺。用本发明中的方法对大豆毛油进行脱胶处理,其脱胶效率比现有方法提高了5~25%,经济效益增加1~3%。
申请公布号 CN102776065B 申请公布日期 2015.01.28
申请号 CN201210256605.8 申请日期 2012.07.24
申请人 东北农业大学 发明人 江连洲;刘天一;于殿宇;张欢;刘飞;刘丹怡;孙立斌;解桂东;关忠;齐晓芬;王立琦
分类号 C11B3/00(2006.01)I;C11B3/04(2006.01)I 主分类号 C11B3/00(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 包埋‑交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体用于大豆毛油脱胶的方法,其特征在于用包埋‑交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体对大豆毛油进行脱胶通过以下步骤实现:一、包埋‑交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体的制备:将1mL酶加入到pH值为5.0的磷酸二氢钠与柠檬酸缓冲液中,调节酶液浓度为0.02~0.07g/mL,在0℃下缓慢加入饱和度为65~90%的乙醇,在pH为3~8的条件下进行沉淀反应时间30min,持续搅拌,从而保证酶聚集体颗粒均匀,然后于10000r/min离心,收集沉淀;交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体的制备及包埋过程:向聚集体悬浮液中加入体积浓度为0.2%戊二醛,搅拌进行交联反应4h,离心去除上清液,用缓冲液冲洗交联酶聚集体数次,直到洗液中检测不到任何的活力,收集沉淀用磷酸盐缓冲液悬浮;在质量浓度1%的20mL海藻酸钠溶液中加入上述酶聚集体1mL,搅拌均匀,静止5min后,用灭菌后的5mL注射器吸入上述混合液,以5滴/s注入浓度0.1~0.35mol/L的CaCl<sub>2</sub>溶液中制成微胶囊,将形成的微胶囊在4℃的CaCl<sub>2</sub>溶液中放置一段时间使其进一步硬化;然后抽滤得到硬化的微胶囊,用无菌生理盐水洗涤3~5次,以洗去表面的CaCl<sub>2</sub>,然后进行冷冻干燥,得到包埋‑交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体;二、取大豆毛油先经水化脱胶法去除大豆毛油中的水化磷脂,然后向经过处理的大豆毛油中加入质量浓度为45%、质量为大豆毛油1.5%的柠檬酸溶液并以1000r/min的速度搅拌12min,再向经过处理的大豆毛油中添加质量浓度为4%的NaOH溶液并不断进行搅拌直至大豆毛油的pH值在4.5~5.5之间停止添加NaOH溶液;三、在55℃条件下向调整好pH值的大豆毛油中加入为调整好pH值的大豆毛油质量的0.25%的包埋‑交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体;四、对加入包埋‑交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体的大豆毛油以50~80r/min的速度搅拌4~8h,然后对加入包埋‑交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体的大豆毛油以6500~7500r/min的速度离心1~5min,去除重相中的杂质,即实现用包埋‑交联磷脂酶A<sub>1</sub>聚集体对大豆毛油进行脱胶的工艺。
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