ホスホロチオエート基を含むオリゴヌクレオチドを用いる、ポリメラーゼ連鎖反応による検出システム

摘要

本発明は、アッセイシステムにおいて核酸を検出するための方法およびキットに関する。一態様では、本発明は、3'→5'ヌクレアーゼ活性を欠くポリメラーゼの存在下で、プライマー伸長反応における非特異的増幅およびプライマー二量体の形成を低減するための方法に関する。別の態様では、本発明は、3'→5'エクソヌクレアーゼ活性を欠くポリメラーゼの存在下で産生される、プライマー伸長産物を検出するための方法であって、相互にハイブリダイズして、蛍光消光対を形成することが可能な、Tmの異なる、第1の単一標識オリゴヌクレオチド配列および第2の単一標識オリゴヌクレオチド配列を用意する工程を含む方法に関する。本発明の方法では、プライマーまたはオリゴヌクレオチド配列のうちの1つまたは複数は、少なくとも1つのホスホロチオエート基を含有する。