一种生殖细胞的诱导方法

摘要

本发明提供一种生殖细胞的诱导方法，它是利用卵泡液诱导羊水细胞或皮肤细胞分化获得生殖细胞。本发明还提供卵泡液在诱导羊水细胞或皮肤细胞分化获得生殖细胞中的应用。本发明优点在于：采用羊水细胞和皮肤细胞作为种子细胞诱导分化获得生殖细胞，属废物利用，原材料廉价，不涉及伦理问题；利用人卵泡液诱导羊水细胞以及人皮肤细胞向生殖细胞诱导分化，方法简单、廉价，且诱导效果好，与现有生殖细胞分化因子相当，从而为卵巢早衰等不孕不育再生医学的生殖细胞研究创立了一个新的方法。

主权项

一种生殖细胞的诱导方法，其特征在于，所述的方法是：将再次剖宫产或进行妇科手术的患者老疤用PBS冲洗除去血细胞，以终浓度0.2 U/ml 胶原酶I、100 U/ml 透明质酸酶进行消化，37℃消化30 min，吹打，终止消化，100目筛子过滤，1500 rpm离心，弃上清，以1×10⁴/cm²接种在培养皿，无血清悬浮培养，2‑3d后加入人卵泡液进行1‑2周诱导，所述的人卵泡液中卵泡液原液和标准EB培养基的体积比为1∶20，所述的卵泡液原液是经以下方法获得的：收集卵泡液标本，混匀，室温下4 000 r/min离心5 min，取上清，0.22μm过滤。