改性玉米醇溶蛋白肽的制备方法

摘要

一种改性玉米醇溶蛋白肽的制备方法，属于玉米醇溶蛋白利用技术领域。本发明以市售玉米醇溶蛋白片为原料，先制备玉米醇溶蛋白乳化液，再经单一酶水解、酰化反应，干燥而得产品，并通过分离、浓缩而得多种副产品。本发明具有工艺简单，操作简便，生产设备简单，生产安全，资源综合利用高，无“三废”排放，有利于环境保护，生产成本低，便于推广应用，生产出产品的水溶性强等特点。本发明可广泛应用于对玉米醇溶蛋白片的改性生产中。采用本发明方法制备出的产品和副产品可广泛应用于纺织、医药、食品、化工等行业中。

主权项

一种改性玉米醇溶蛋白肽的制备方法，其特征在于所述方法的具体方法步骤如下：(1)制备玉米醇溶蛋白乳化液以市售的玉米醇溶蛋白片为原料，将玉米醇溶蛋白片放置于粉碎机中，对玉米醇溶蛋白片进行粉碎，收集粉碎物，并用200～300目的分样筛进行筛分，分别收集过筛粉末和未过筛的玉米醇溶蛋白片，对于收集的未过筛玉米醇溶蛋白片，送入粉碎机中再次进行粉碎，对于收集的过筛粉末，按照过筛的玉米醇溶蛋白粉末的质量∶蒸馏水的体积之比为1g∶50～100mL的比例，在2500～5000r/min的搅拌速度下，直至玉米醇溶蛋白粉全部分散于蒸馏水中时止，就制备出玉米醇溶蛋白乳化液；(2)进行酶水解第(1)步完成后，先将第(1)步制备出的玉米醇溶蛋白乳化液泵入反应釜中，并向反应釜的夹层通入蒸汽，在搅拌速度为60～200r/min下，升温至釜中玉米醇溶蛋白乳化液的温度达到50～60℃时，再按照碱性蛋白酶的质量∶玉米醇溶蛋白乳化液中玉米醇溶蛋白粉的质量∶巯基乙醇的体积之比为1g∶25～100g∶10～20mL的比例，先加入巯基乙醇，搅拌均匀后再加入碱性蛋白酶，在50～60℃恒温下进行搅拌酶水解40～80min，就制备出水解率为80～91％酶水解玉米醇溶蛋白溶液，然后将制备出的酶水解玉米醇溶蛋白溶液泵入到离心机中，在3000～4000r/min的转速下进行离心分离30～60min，分别收集离心清液和离心沉淀，将收集的离心清液泵入截留分子量为1000～5000Da的超滤机中，在压力为0.05～0.15Mpa的条件下进行超滤，直至超滤压力达到0.16～0.22Mpa时停止超滤，分别收集超滤滤过液和超滤截留液，即为酶水解玉米醇溶蛋白超滤分级液；(3)进行酰化在第(2)步完成后，先将第(2)步收集的超滤截留液，泵入到带搅拌机的反应釜中，按照酶水解玉米醇溶蛋白超滤截留液∶蒸馏水的体积之比为1∶2～5的比例，加入蒸馏水，接着开启反应釜的搅拌机，控制搅拌速度在60～200r/min下，再按照琥珀酸酐的质量∶反应釜中溶液的体积之比为1g∶20～200mL的比例加入琥珀酸酐，并用NaOH溶液调节反应釜中溶液的pH至9～10，继续搅拌且在室温下进行酰化反应30～60min，就制备出酰化度为90～98％的琥珀酸酰化水解玉米醇溶蛋白溶液，然后将制备出的琥珀酸酰化水解玉米醇溶蛋白溶液泵入真空浓缩机中，在真空度为0.05～0.08Mpa下，进行真空浓缩直至浓缩液中琥珀酸酰化水解玉米醇溶蛋白的质量浓度达到20～30％时止，收集浓缩液，并按照浓缩液∶甲醇的体积比为1∶3～6的比例，在30～60r/min的搅拌速度下，加入甲醇，且继续以30～60r/min的速度搅拌5～15min，最后将混合液泵入防爆型离心机中，在转速为3000～4000r/min下，进行离心分离30～60min，分别收集离心清液和离心沉淀，对于收集的离心沉淀，放置于真空干燥箱中，在60～80℃、0.05～0.08Mpa的真空度下进行真空干燥3～6h，就制备出琥珀酸酰化水解玉米醇溶蛋白粉末产品；(4)制备副产物①日化用的植物角蛋白浓缩液的制备第(3)步完成后，在第(2)步收集的离心沉淀中，先加入蒸馏水进行稀释，加入的蒸馏水体积为离心沉淀体积的1～5倍，以30～60r/min的速度搅拌5～15min，就制备出沉淀稀释液，再将沉淀稀释液泵入反应釜中，按照巯基乙醇溶液∶沉淀稀释液的体积比为1∶50～100的比例，加入巯基乙醇溶液，用盐酸溶液调节体系的pH值为3.5～5.0，在搅拌速度为30～60r/min的条件下搅拌直至沉淀完全溶解为止，就制备出植物角蛋白溶液，最后将制备出的植物角蛋白溶液泵入真空浓缩机中，在60～80℃、0.05～0.08Mpa的真空度下进行真空浓缩，直至浓缩液中蛋白质浓度达到10～15％时止，收集该浓缩液，并进行真空过滤，分别收集滤渣和滤液，在收集的滤液中再加入0.1～0.5％的百霉杀防腐剂，搅拌混合均匀就制备出植物角蛋白浓缩液副产物；②小分子肽营养强化剂的制备第(4)‑①步完成后，将第(2)步收集的超滤滤过液，泵入纳滤器中，用截留分子量为500～1500Da的纳滤膜、在0.1～0.5Mpa下进行纳滤浓缩，直至纳滤截留液中蛋白质百分浓度达到15～20％时止，分别收集纳滤滤过液和纳滤截留液，对于收集的纳滤截留液，因含小分子水解醇溶蛋白肽，泵入喷雾干燥机中，在进风温度为120～150℃、出风温度为80～90℃、喷雾离心机转速为8000～11000r/min的条件下进行喷雾干燥，收集干燥粉末，就制备出小分子肽营养强化剂副产物；(5)回收甲醇第(4)‑②完成后，将(3)步制备出的离心清液泵入甲醇精馏机中，在65～90℃的条件下进行精馏，直至精馏残液中无甲醇时止，分别收集馏出液和精馏残液，对收集的馏出液，即为浓度为85～95％的甲醇。