发明名称 |
一种rhIL-10重组载体构建及其蛋白提纯的方法 |
摘要 |
一种hIL-10重组载体,采用IMPACT系统表达,其融合蛋白标签为6个组氨酸(6×His)的重组载体,如重组载体的质粒图谱所示;重组载体的构建、表达及鉴定方法步骤包括:1)rh-IL10基因的扩增;2)重组载体的构建、表达及其鉴定;rh-IL10融合蛋白的纯化方法步骤为:1)融合蛋白his-intein-IL10-RGD的粗提;2)包涵体洗涤;3)包涵体溶解;4)融合蛋白his-intein-IL10-RGD的纯化;5)融合蛋白his-intein-IL10-RGD的复性及自切割;6)IL10-RGD纯化;增加了hIL-10在体内的靶向性,赋予了蛋白具有抗肿瘤以及机体免疫功能的活性,更为重要的是其在伤口愈合过程中能够与新生血管内皮细胞特异靶向结合,从而预防抑制瘢痕纤维化的形成。 |
申请公布号 |
CN104946679A |
申请公布日期 |
2015.09.30 |
申请号 |
CN201510325665.4 |
申请日期 |
2015.06.15 |
申请人 |
中国人民解放军第四军医大学 |
发明人 |
杨芳芳;胡大海;石继红;王许杰;官浩;郑朝;王洪涛;高建新 |
分类号 |
C12N15/63(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/63(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种hIL‑10重组载体,其特征在于,采用IMPACT系统表达,其融合蛋白标签为6个组氨酸(6×His)的重组载体,如重组载体的质粒图谱所示。 |
地址 |
710032 陕西省西安市长乐西路127号 |