一种构建高通量测序文库的方法

摘要

本发明属于基因工程及分子生物学领域，具体涉及一种构建高通量测序文库的方法。步骤包括对（1）DNA进行片段化；（2）纯化；（3）连接接头；（4）扩增；（5）小片段去除；（6）文库固定等步骤。本发明的接头连接效率高，利用本发明的方法，能够简单、高效地利用测序板，降低了样品和试剂的损耗，构建高通量测序文库。

主权项

一种构建高通量测序文库的方法，其特征在于，包括以下步骤:样品DNA提取及定量；DNA片段化、纯化及片段选择：打断DNA，温度在20℃以下，纯化回收；DNA片段质量评价；DNA片段平端化：补平5’端缺口，去除3’端的粘性末端；接头连接磷酸：接头5’链末端是引物端，带有生物素，在接头的一侧有标签，其中平端化的接头5’末端连接磷酸基团；DNA片段连接接头：连接磷酸基团后，接头通过连接酶与平端化的DNA片段相连；DNA文库固定；小片段去除，PCR扩增，得到DNA文库；DNA文库分离：对DNA文库进行变性，将未结合生物素的DNA片段洗脱下来，即为测序文库。