用于扩增核酸的方法

摘要

本发明描述了用于扩增靶标核酸的方法，其中靶标核酸与通过5'末端固定在支持物上的捕获探针核酸杂交。用聚合酶进一步延伸杂交产物以形成双链核酸。将发夹核酸连接至此双链核酸。将此连接产物进一步扩增并测序。

主权项

用于扩增靶标核酸的方法，所述方法包括如下步骤:a)提供具有多个核酸捕获探针的支持物,其中所述多个探针通过核酸的5'末端固定在支持物上,b)将靶标核酸与捕获核酸探针杂交以形成探针/靶标复合物,c)用聚合酶延伸捕获探针核酸，其中靶标核酸被用作捕获探针核酸延伸的模板,d)将经延伸的靶标/探针双链核酸连接至发夹核酸，其中将发夹核酸的5'末端连接至经延伸的探针的3'末端并且将发夹核酸的3'末端连接至靶标核酸的5'末端,e)使靶标核酸的3'末端结合至所述支持物上的所述多个核酸捕获探针中的另外的探针,f)通过聚合酶延伸所述另外的探针的3'末端,g)通过重复步骤e)和f)扩增步骤f)中所获得的核酸，其中所述发夹核酸形成平端茎或者其中发夹的5'突出端是胸腺嘧啶核苷。