从三种高山鼠尾草植物中制备隐丹参酮化学对照品的方法

摘要

本发明涉及一种从三种高山鼠尾草植物中制备隐丹参酮化学对照品的方法，该方法包括以下步骤：⑴微孔树脂除杂：粘毛鼠尾草、甘西鼠尾草或康定鼠尾草中的一种醇提物用乙醇溶液溶解，过滤、上微孔树脂柱分离，先以水溶液洗脱除杂，然后用甲醇溶液进行台阶梯度洗脱，收集70%~90%甲醇水洗脱物，该甲醇水洗脱物经减压干燥得丹参酮类组分粗品；⑵硅胶柱富集：将丹参酮类组分粗品经硅胶柱色谱分离、洗脱，收集Rf值为0.75~0.85的馏分；该馏分经减压干燥即得红色粉末状的隐丹参酮粗品；⑶反相液相制备色谱精制：隐丹参酮粗品用甲醇溶液溶解，经过滤、反相液相制备色谱分离，收集色谱峰馏分，该色谱峰馏分经减压干燥即得红色粉末状的对照品。本发明工艺简单、易规模化。

主权项

从三种高山鼠尾草植物中制备隐丹参酮化学对照品的方法，包括以下步骤：⑴微孔树脂除杂：按常规方法制得的棕红色浸膏状的粘毛鼠尾草、甘西鼠尾草或康定鼠尾草中的一种醇提物用其质量10~20倍的体积分数30~50%的乙醇溶液溶解，过滤得到滤液A，该滤液A上微孔树脂柱分离，先以2~5倍柱体积的水溶液洗脱除去杂质，然后用2~5倍柱体积、体积分数30~90%的甲醇溶液进行台阶梯度洗脱，收集70%~90%甲醇水洗脱物，该甲醇水洗脱物经减压干燥得丹参酮类组分粗品；所述粘毛鼠尾草、甘西鼠尾草或康定鼠尾草中的一种醇提物与所述微孔树脂比例为1 g：10 mL；⑵硅胶柱富集：将所述丹参酮类组分粗品经硅胶柱色谱分离后，用3~5倍柱体积的氯仿‑甲醇‑水混合溶剂洗脱，按每份500 mL收集馏分，并经薄层色谱检测，其中展开剂为氯仿‑甲醇‑水混合溶剂，显色剂为体积浓度10%的浓硫酸乙醇溶液，合并Rf值为0.75~0.85的馏分；所述Rf值为0.75~0.85的馏分经减压干燥即得红色粉末状的隐丹参酮粗品；⑶反相液相制备色谱精制：所述隐丹参酮粗品用其质量5~10倍的体积分数为80%~100%的甲醇溶液溶解，然后配制样品浓度为100.0~200.0 mg/mL，经0.45μm微孔滤膜过滤，得到滤液B，该滤液B经反相液相制备色谱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中主要的色谱峰馏分，该色谱峰馏分经减压干燥即得纯度大于98%的红色粉末状的对照品。