发明名称 一种油菜角果RNA快速提取方法
摘要 本发明公开了一种油菜角果RNA快速提取方法,通过将油菜角果氮速冻研磨成粉,添加RNA提取试剂、乙酸钠和氯仿/异戊醇混合液离心,取上清液,与无水乙醇和NaCl溶液混匀,再经离心、除杂,用DEPC-SDS-H<sub>2</sub>O溶解保存。本发明方法简单、经济,可快速高效获得油菜角果RNA,能够很好地用于后续的分子生物学实验研究。
申请公布号 CN104928282A 申请公布日期 2015.09.23
申请号 CN201510323517.9 申请日期 2015.06.11
申请人 云南农业大学 发明人 林良斌;龚莹;张传利;彭少丹;刘雅婷
分类号 C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 四川君士达律师事务所 51216 代理人 芶忠义
主权项 一种油菜角果RNA快速提取方法,其特征在于包括以下步骤:1)取0.1g新鲜的油菜角果放在研钵中,加入液氮,迅速研磨成粉末;2)加入1ml RNA提取缓冲液覆盖粉末,然后加入0.8ml水饱和酚覆盖,放置通风橱至混匀;再加入0.2ml氯仿/异戊醇混合液,混匀后转移至灭菌的离心管;3)在4℃12000rpm离心10min,取上清液入另一离心管,然后依次加入2倍体积的无水乙醇,0.1倍体积的5M NaCl溶液,充分混匀,‑20℃沉淀RNA;4)在4℃12000rpm下离心20min,弃上清;5)加70%乙醇,振荡悬浮沉淀,在4℃12000rpm下离心5min,弃上清;6)沉淀风干后,加50μl DEPC‑SDS‑H<sub>2</sub>O溶解沉淀,测浓度,‑20℃保存。
地址 650201 云南省昆明市北市区黑金路95号云南农业大学农学院