双抗夹心ELISA定量检测斑马鱼M3_a受体蛋白方法

摘要

本发明涉及双抗夹心ELISA定量检测斑马鱼M3a受体蛋白方法，ELISA以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来，敏感性很高。由于抗原、抗体的反应是在聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，保证试验结果的特异性与稳定性。解决现有方法技术中存在的稳定性差、操作复杂的问题。

主权项

一种双抗夹心ELISA定量检测斑马鱼M3a受体蛋白方法，其特征在于：包括如下步骤：以小鼠M3a受体为抗原，按以下步骤进行处理：包被抗原、洗涤、封闭、洗涤、加一抗、洗涤、加二抗、洗涤、加显色底物、加显色终止液，用酶标仪测定样品的吸光值450nm以下，绘制以M3a受体浓度为横坐标，以OD值为纵坐标的标准曲线，建立回归方程；以斑马鱼蛋白提取物为抗原，按以下步骤进行处理：包被抗原、洗涤、封闭、洗涤、加一抗、洗涤、加二抗、洗涤、加显色底物、加显色终止液，然后用酶标仪测定样品的吸光值450nm以下，将吸光值代入回归方程，得到斑马鱼中M3a受体含量。