摘要 |
RNAテンプレートを増幅する方法が提供される。方法は、RNAテンプレートと、RNAテンプレートにハイブリダイズすることができる1以上のプライマーと、逆転写酵素と、デオキシヌクレオシド三リン酸(dNTP)とを含む第1の反応混合物を使用して、リボ核酸(RNA)テンプレートを逆転写してcDNAを形成すること;及び1以上の鎖置換DNAポリメラーゼと、1以上のイノシン含有プライマーと、プライマーのイノシン残基の3’側のDNAにニックを入れることができるヌクレアーゼとを含む第2の反応混合物を使用して、cDNAを増幅して増幅産物を形成することを含む。方法は、cDNAテンプレートを変性させずに等温条件下で実施される。サンプル中のRNAテンプレートを定量する方法、及びサンプル中のRNAテンプレートを検出する方法も提供される。リボ核酸(RNA)テンプレートからデオキシ核酸(DNA)を増幅するためのキットも提供される。【選択図】図1 |