利用GST表达体系制备AQP7胞外段抗体及应用

摘要

本发明属于生物工程技术领域，涉及利用GST表达体系制备的AQP7胞外段高效价抗体及应用。利用基因工程技术，将AQP7基因胞外段克隆到原核表达载体中，经酶切鉴定后,用重组质粒转化大肠杆菌，并IPTG诱导产生GST-AQP7融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰兔制备抗血清并用ProteinA/G纯化。抗体的效价及特异性采用ELISA和Westernblot检测。该抗AQP7多克隆抗体效价与特异性良好,可以应用于细胞中AQP7蛋白的检测并能有效检出AQP7蛋白在不同细胞中的差异表达，对于系统研究AQP7蛋白功能意义重大。

主权项

利用GST表达体系制备的AQP7蛋白胞外段高效价抗体,其特征在于利用GST表达体系以(AQP7蛋白218‑255位氨基酸对应对应DNA片段作为特异序列制备的GST‑AQP7融合蛋白作为抗原免疫动物产生抗血清而获得，该抗血清中抗GST‑AQP7抗体的滴度高达1∶1000000，并经过Westernblot鉴定该AQP7抗体具有较好的特异性，其中，218‑255位氨基酸序列为： 其对应核苷酸序列为： 。