发明名称 小儿七星茶制剂氨基酸指纹图谱的检测方法及构建方法
摘要 本发明公开了一种小儿七星茶制剂氨基酸指纹图谱的检测方法及构建方法,检测方法包括以下步骤:(1)对照品溶液的配制;(2)供试品溶液的制备;(3)采用高效液相色谱仪进行测定。本发明能有效表征小儿七星茶制剂的质量,有利于监控产品的质量;具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好的优点;可快速、准确地鉴别产品的真伪优劣。
申请公布号 CN103698453B 申请公布日期 2015.09.09
申请号 CN201310695252.6 申请日期 2013.12.16
申请人 广州王老吉药业股份有限公司 发明人 方广宏;郑荣波;苏子仁;黄晓丹;彭绍忠
分类号 G01N30/88(2006.01)I 主分类号 G01N30/88(2006.01)I
代理机构 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 代理人 万志香;曾旻辉
主权项 一种小儿七星茶制剂氨基酸指纹图谱的检测方法,其特征在于,采用高效液相色谱进行检测,包括以下步骤:(1)对照品溶液的配制:将甘氨酸、天冬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、组氨酸、丝氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、精氨酸、色氨酸、谷氨酸对照品各取10mg,分别用体积百分比浓度为28‑32%的乙醇溶液溶解并定容至20mL,摇匀;将胱氨酸、酪氨酸各取10mg,分别用0.08‑0.12mol/mL盐酸溶解并定容至20mL,摇匀;得19种氨基酸溶液;分别吸取上述氨基酸溶液,分别加入体积百分比浓度为15.5‑16.5%的三乙胺的乙腈溶液、体积百分比浓度为1.75‑1.85%的苯异硫氰酸酯的乙腈溶液,涡旋混匀,室温放置0.8‑1.5h,加入正己烷萃取,取下层溶液,微孔滤膜滤过,得19种氨基酸单一对照品溶液;取等量的上述19种氨基酸单一对照品溶液,构成19种氨基酸混合对照品溶液;(2)供试品溶液的制备:取小儿七星茶制剂样品,上阳离子树脂,先用蒸馏水洗脱,弃去水洗液;再用1.8‑2.2mol/L氨水洗脱,收集氨洗液;再用0.8‑1.2mol/L氨水洗脱,收集氨洗液;将上述氨洗液减压浓缩,吸取浓缩液,加入体积百分比浓度为15.5‑16.5%的三乙胺的乙腈溶液、体积百分比浓度为1.75‑1.85%的苯异硫氰酸酯的乙腈溶液,涡旋混匀,室温放置0.8‑1.5h,加入正己烷萃取,取下层溶液,微孔滤膜滤过,得供试品溶液;所述小儿七星茶制剂样品为小儿七星茶糖浆、小儿七星茶口服液或用蒸馏水溶解后的小儿七星茶颗粒;(3)测定:分别进样所述19种氨基酸混合对照品溶液、供试品溶液,注入高效液相色谱仪测定;所述高效液相色谱仪的条件为:色谱柱以碳十八烷基硅烷基键合硅胶为填料,流动相:0.025mol/L乙酸钠溶液为流动相A,乙腈为流动相B,采用梯度洗脱方式;流速:1mL/min;检测波长:254nm;所述梯度洗脱的流动相条件如下:<img file="FDA0000678667240000021.GIF" wi="2055" he="532" />
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