一种HLA-DQB1基因分型的组特异性引物PCR-SBT方法及试剂

摘要

本发明提供一种用于HLA-DQB1基因分型的组特异性引物PCR-SBT试剂，它由用于扩增的6对组特异性引物和用于测序分析的4条寡核苷酸测序引物组成；本发明还提供应用上述试剂的HLA-DQB1基因分型的组特异性引物PCR-SBT方法，本发明所提供的试剂和方法可作为一种独立的、应用广泛的鉴定方法，能成功解决HLA-DQB1位点的准确分型鉴定问题，有利于提高造血干细胞移植供受者HLA配型的准确性，从而选择更合适的移植供者，降低移植过程中的排斥反应，这对于进一步提高器官移植的成功率和生存率具有重要的意义。

主权项

一种HLA‑DQB1基因分型的组特异性引物PCR‑SBT试剂，其特征在于：所述试剂由用于扩增HLA‑DQB1不同等位基因的6对组特异性引物和用于测序分析的4条寡核苷酸测序引物组成；所述用于扩增的6对组特异性引物为：(1) 扩增HLA‑DQB1*02 组的特异性引物DQB1*02F：5'‑CTCGTCATTCCCTTGAACTG‑3'DQB1*02R：5'‑AACCACCGGACTTTGATCTG‑3'，(2) 扩增HLA‑DQB1*03:01组的特异性引物DQB1*0301F：5'‑TCAAAAGCTTGTGCTCTTTCAG‑3'DQB1*0301R：5'‑CAGTCCCTCCGAGCTATCAG‑3'，(3) 扩增HLA‑DQB1*03组（除DQB1*03:01外）和DQB1*04组的特异性引物DQB1*04F：5'‑GATGAGGTGAGCACAGTCGG‑3'DQB1*04R：5'‑CTCCGAGCTATCAGGACTGG‑3'，(4) 扩增HLA‑DQB1*05 组的特异性引物DQB1*05F：5'‑ACAGCAGGATTTGTCATTTCA‑3'DQB1*05R：5'‑GTCCTGTCTCCTCGCACTTC‑3'，(5)扩增HLA‑DQB1*06:01 组的特异性引物DQB1*0601F：5'‑GGAAATACAAGGCAGCAATGA‑3'DQB1*0601R：5'‑CCTGCTGAGGAGCTGAAGTC‑3'，(6) 扩增HLA‑DQB1*06组(除DQB1*06:01外)的特异性引物DQB1*0602F：5'‑CAAGACTGCCTGGACTTAGG‑3'DQB1*0602R：5'‑AGGACTGGGATTCAGAGCAA‑3'；所述4条寡核苷酸测序引物序列如下：    DQB1‑2F：5'‑GGCCSGTGATTCCYCGCAG‑3'，    DQB1‑2R：5'‑GGKCRACSMCGCTCACCTC‑3'，    DQB1‑3F：5'‑CTTTYCCTGTCTGTTACTGC‑3'，DQB1‑3R：5'‑GGCCCAYARTAACAGAAACTC‑3'。