一种用于细胞原位检测小分子化合物与靶蛋白相互作用的方法

摘要

本发明公开了一种用于细胞原位检测小分子化合物与靶蛋白相互作用的方法，具体是以细胞在非变性条件下裂解时所获得的具有完整生理结构的蛋白质为基础，选用适当的小分子化合物与靶蛋白孵育形成复合体，通过特异性的抗体诱捕靶蛋白并将与靶蛋白相互作用的小分子化合物一同捕获，结合质谱分析以实现在细胞原位水平检测小分子化合物与靶蛋白之间是否具有相互作用。本发明所述方法可直接应用于先导药物的靶点验证，也可用于以特定蛋白为靶点的先导药物的筛选。另一方面，本发明所述方法是在保持细胞内全部蛋白未丢失、未变性的条件下进行的分析过程，符合体内实际情况，所得试验结果更可靠；再者，本发明所述方法灵敏度高、无背景干扰。

主权项

一种用于细胞原位检测小分子化合物与靶蛋白相互作用的方法，其特征在于：以细胞在非变性条件下裂解时所获得的具有完整生理结构的蛋白质为基础，选用适当的小分子化合物与靶蛋白孵育形成复合体，通过特异性的抗体诱捕靶蛋白并将与靶蛋白相互作用的小分子化合物一同捕获，结合质谱分析以实现在细胞原位水平检测小分子化合物与靶蛋白之间是否具有相互作用。