一种羧基微球标记蛋白的方法

摘要

本发明提供了一种羧基微球标记蛋白的方法，属于免疫诊断试剂盒制备领域。本发明通过在羧基微球标记蛋白的体系中，根据微球表面羧基含量，设定交联剂EDC：-COOH的摩尔比为0.8～2：1，并使EDC：NHS或Sulfo-NHS的摩尔比为1～3：1，使微球表面的羧基数量和活化的羧基数量处于最佳的比例，同时调节pH值使反应体系快速从利于活化的条件转为利于抗体连接的状态，并省去离心或切向流过滤的步骤，最终实现简化标记步骤，节省成本，达到羧基微球高效标记蛋白的目的。本发明方法可应用于以胶乳微球或磁性微球为载体的检测试剂盒的制备中，具有较好的市场应用前景和经济价值。

主权项

一种羧基微球标记蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将羧基微球悬于活化液中，所述活化液为10～50mM MES，pH 5.0～7.0；(2)按照EDC与羧基微球表面羧基含量的摩尔比0.8～2:1，向步骤(1)的体系中加入EDC；再加入NHS或Sulfo‑NHS，使其与EDC的摩尔比为1～3：1，边加边搅拌；(3)立即调节步骤(2)体系的pH值为8～10，调节完毕立即加入待标记的蛋白，搅拌；(4)使微球与未标记蛋白分离，用储存液重悬微球，所述储存液为10mM Tris，0.1％BSA，0.1％NaN₃，pH 7.5。