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<p>Método para identificar la presencia o ausencia de fragmentos de restricción en una muestra, que comprende las etapas de: (a) proporcionar dos o más muestras de ácidos nucleicos; (b) digerir cada muestra de ácido nucleico con al menos una endonucleasa de restricción para obtener un conjunto de fragmentos de restricción; (c) proporcionar adaptadores sintéticos bicatenarios que comprenden - una secuencia complementaria del cebador 5', - una sección identificadora específica de la muestra, - al menos un extremo que se puede ligar al extremo romo o que sobresale de un fragmento de restricción; (d) ligar los adaptadores sintéticos bicatenarios a los fragmentos de restricción en el conjunto, para proporcionar un conjunto de fragmentos de restricción ligados al adaptador; (e) opcionalmente, amplificar el conjunto de fragmentos de restricción ligados al adaptador, con uno o más cebadores que son al menos complementarios a: - la secuencia complementaria del cebador 5' del adaptador, - la sección identificadora específica de la muestra del adaptador, y, - opcionalmente, una sección del adaptador que es complementaria a los restos que sobresalen de la secuencia de reconocimiento de al menos una endonucleasa de restricción, para proporcionar fragmentos de restricción ligados al adaptador amplificados (amplicones); (f) determinar la secuencia de al menos la sección identificadora específica de la muestra, los restos de la secuencia de reconocimiento de al menos una endonucleasa de restricción y parte de la secuencia del fragmento de restricción situada adyacente a la secuencia derivada del adaptador o adyacente a los restos de la secuencia de reconocimiento de al menos una endonucleasa de restricción, (g) comparar dos o más muestras para la presencia o ausencia de fragmentos de restricción ligados al adaptador; (h) identificar la presencia o ausencia de fragmentos de restricción ligados al adaptador en la muestra.</p> |
