PEG/磷酸盐双水相体系分离乳源乳清蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种PEG/磷酸盐双水相体系分离乳源乳清蛋白α-La和β-Lg的方法，属于乳清蛋白组分分离技术。本发明通过对乳源乳清蛋白进行提取；在PEG/磷酸盐双水相体系分离α-La和β-Lg，其中双水相体系中PEG质量分数为10.4%～14.4%，磷酸盐浓度为10.8%～18.8%，体系pH为7.3；后采用考马斯亮蓝法测量蛋白质浓度和用SDS-PAGE电泳进行鉴定检测。本发明的方法提供一种廉价、操作简便、易于放大并且可以应用于工业化大规模生产的乳清蛋白分离技术；分离得到的乳源乳清蛋白α-La和β-Lg在功能性食品及生物活性产品的生产中应用。

主权项

一种PEG/磷酸盐双水相体系分离乳源乳清蛋白α‑La和β‑Lg的方法，其特征在于具体分离鉴定步骤如下：（1）乳源乳清蛋白提取：动物乳脱脂，脱脂乳调节pH4.6，静置30min，离心后弃去沉淀，上清液经过滤透析后冻干，获得乳清蛋白；（2）PEG/磷酸盐双水相体系分离α‑La和β‑Lg：取步骤（1）中获得乳清蛋白以0.1～0.5mg/mL的浓度分布在PEG/磷酸盐双水相体系中；充分摇匀溶解，离心后，于25℃静置待完全分相后分别收集上、下两相液体；（3）分别测定上、下两相液体中乳清蛋白浓度和进行SDS‑PAGE电泳鉴定检测；步骤（2）中所述的PEG/磷酸盐双水相体系为PEG质量分数10.4%～14.4%，磷酸盐质量分数10.8%～18.8%，体系pH7.3的PEG/磷酸盐双水相体系。