一种用于生猪辅助防疫的复合微生态制剂

摘要

本发明提供一种用于生猪辅助防疫的复合微生态制剂，其制备方法的具体步骤：将冷冻保藏管中的嗜酸乳杆菌、醋酸杆菌、沼泽红假单胞菌、酿酒酵母分别在斜面中活化，之后纯化得各斜面菌种，备用；利用各斜面菌种制备相应的原菌液；将各原菌液按1：1：1：1的菌量比接种于已灭菌的发酵培养基Ⅰ中进行培养，得复合微生态制剂的一级种子；将一级种子按5%的接种量接种于已灭菌的发酵培养基Ⅱ中培养得复合微生态制剂的二级种子；最后将二级种子按5%的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ培养以获得复合微生态制剂的成品。利用本发明复合微生态制剂能够在生猪养殖场起到阻隔病菌传播的作用，从而提高了生猪养殖抗病能力。

主权项

一种用于生猪辅助防疫的复合微生态制剂，其特征在于：其制备方法的具体步骤如下：(1)原菌种斜面培养：将冷冻保藏管中的嗜酸乳杆菌、醋酸杆菌、沼泽红假单胞菌、酿酒酵母分别在斜面中活化，之后分别置于90mm培养皿中进行纯化，得嗜酸乳杆菌斜面菌种、醋酸杆菌斜面菌种、沼泽红假单胞菌斜面菌种、及酿酒酵母斜面菌种，备用；(2)原菌种液体培养：将嗜酸乳杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅰ中，之后置于37℃下厌氧培养1‑2天得嗜酸乳杆菌原菌液；将醋酸杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅱ中，接着于30℃下好氧培养1‑2天得醋酸杆菌原菌液；将沼泽红假单胞菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅲ中，接着于28℃‑30℃厌氧钨丝灯光照培养5‑7天得沼泽红假单胞菌原菌液；将酿酒酵母斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅳ中，之后于28℃‑30℃下好氧培养3天得酿酒酵母原菌液；(3)一级种子培养：将嗜酸乳杆菌原菌液、醋酸杆菌原菌液、沼泽红假单胞菌原菌液、及酿酒酵母原菌液按1：1：1：1的菌量比接种于已灭菌的发酵培养基Ⅰ中进行培养，具体地：先接种醋酸杆菌原菌液与酿酒酵母原菌液，并于30℃下好氧培养3天，再接种嗜酸乳杆菌原菌液与沼泽红假单胞菌原菌液，于30℃下厌氧培养3天，得复合微生态制剂的一级种子；(4)二级种子培养：将所得的一级种子按5％的接种量接种于已灭菌的发酵培养基Ⅱ中，并于30℃下先好氧培养3‑5天再厌氧培养3‑5天，得复合微生态制剂的二级种子；(5)成品培养：将所得的二级种子按5％的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ中，并于30℃下先好氧3‑5天再厌氧培养3‑5天，获得复合微生态制剂的成品；其中，所述液体培养基Ⅰ的组分：蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸钠5克、柠檬酸二胺2克、吐温801克、磷酸氢二钾2克、硫酸镁0.2克、硫酸锰0.05克、碳酸钙20克、琼脂15克、水1000ml、pH6.8；所述液体培养基Ⅱ的组分：酵母粉10克、葡萄糖10、磷酸氢二钾0.5克、硫酸镁0.5克、水1000ml、pH5.5；所述液体培养基Ⅲ的组分：酵母粉10克、磷酸氢二钾1克、硫酸镁0.5克、水1000ml、pH 7.0‑7.2；所述液体培养基Ⅳ的组分：马铃薯200克、蔗糖20克、水1000ml、pH自然；所述发酵培养基Ⅰ的组分：桔水5％、酵母粉0.5％、蛋白胨1％、氯化铵0.1％、氯化钠0.1％、磷酸二氢钾0.05％、硫酸镁0.05％、硫酸锌0.025％、硫酸亚铁0.025％，余量水；所述发酵培养基Ⅱ的组分：桔水5％、酵母粉0.1％、蛋白胨0.1％、氯化铵0.1％、氯化钠0.05％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.05％、硫酸锌0.025％、硫酸亚铁0.025％，余量为水；所述发酵培养基Ⅲ的组分：桔水5％、氯化铵0.2％、氯化钠0.05％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.05％、硫酸锌0.025％、硫酸亚铁0.025％，余量为水。