家蚕血细胞特异表达基因组织蛋白酶O调控元件的鉴定

摘要

本发明涉及家蚕血细胞特异性表达基因的筛选方法及由蛋白酶O基因启动子的克隆，分析发现其血细胞特异表达调控元件的方法。通过下述步骤制得：1、首先通过家蚕组织芯片表达数据、转录组数据和定量RT-PCR等方法，筛选出血细胞特异表达候选基因蛋白酶O基因，成功验证该基因家蚕血细胞特异表达。2、成功对相关基因启动子进行克隆，并进行功能分析。3、成功对Bac-to-Bac杆状病毒表达系统进行了改进，建立了有效的血细胞启动子检测体系。最后在细胞和个体水平对候选基因启动子活性进行检测，并对其组织特异性进行了验证。4、通过本研究得到家蚕血细胞特异性基因蛋白酶O基因启动子，分析发现其启动子在转录起始位点上游-333到-80之间片段具有组织特异性调控元件，控制该基因在血细胞的特异表达。

主权项

家蚕血细胞特异性表达基因的筛选方法及由蛋白酶O基因启动子的克隆，分析发现家蚕血细胞特异调控元件的方法。其特征在于，所述方法包含对Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统进行了改装，蛋白酶O基因启动子其启动子在转录起始位点上游‑333到‑80之间片段具有组织特异性调控元件。