一种制备发菜细胞内类菌胞素氨基酸粗品的方法

摘要

本发明属于微藻生物技术领域，特别公开了一种制备发菜细胞内类菌胞素氨基酸粗品的方法。该方法通过对发菜细胞进行紫外辐射处理，低盐胁迫处理，处理后发菜细胞重新在BG-11培养基中培养15天，发菜细胞内MAA含量显著提高，最后再对MAAs粗品进行提取。本发明工艺简单，生产效率高，生产获得的发菜细胞中类菌胞素氨基酸，经分离纯化后可以用作抗氧化和防紫外辐射的化妆品原料或者抗氧化药物原料。

主权项

一种制备发菜细胞内类菌胞素氨基酸粗品的方法，以发菜单体细胞为初始培养细胞菌株，其特征为，包括如下步骤：（1）将培养至对数期的光合自养发菜细胞置于90mm培养皿中，垂直放置在紫外灯管下，通过调节灯管和培养皿的距离控制紫外辐射强度在1‑6W/m²，处理时间为24‑48h，紫外辐射处理后细胞作为种子液备用；（2）将步骤（1）中得到的种子液重新接种到含有NaCl的BG‑11培养基中，培养2d，离心收集细胞，作为种子液备用；（3）将步骤（2）中获得的种子液接种到含有碳源的BG‑11培养基中，培养15‑20天，发菜细胞进行混合营养高密度生长，收获发菜细胞；（4）将步骤（3）收获的发菜细胞培养液离心，收集发菜细胞，用微波方法破碎细胞，细胞破碎液加入甲醇溶液，水浴保温提取2h，离心，收集上清液，在0‑4℃条件下放置24h，然后用滤纸过滤，收集滤液，滤液进行旋转蒸发，蒸发温度为40‑50℃，浓缩后加入水和氯仿混合物，去除色素，离心收集水相，真空冷冻干燥后制得粗品。