一种微生物法制备海洋鱼蛋白降血压肽的方法

摘要

本发明公开一种微生物法制备海洋鱼蛋白降血压肽的方法，属于食品加工领域。本发明以海洋鱼为原料，采用胃蛋白酶酶解和枯草芽孢杆菌发酵法，制备生物活性肽降血压肽。先利用胃蛋白酶处理海洋鱼肉，将胶原蛋白从鱼肉蛋白中分离出来。接种枯草芽孢杆菌，同时利用微生物的发酵和产酶特性，使海洋鱼胶原蛋白在受到枯草芽孢杆菌侵蚀的同时，还受到该菌所产的多种蛋白酶的酶解。本发明采用控制微生物接种量、发酵温度、pH值及发酵时间的协调作用，达到一种“可控发酵+复合酶解”制备特定功能的活性肽——降血压肽的目的。

主权项

一种微生物法制备海洋鱼蛋白降血压肽的方法，其特征是包括以下步骤：前处理：海鱼去皮、骨、刺、杂质后，将鱼肉打成匀浆；胶原蛋白提取：在鱼肉匀浆中加入与鱼肉质量比为1:10或1:15的纯净水，再加入2000U/g鱼肉‑3000U/g鱼肉的胃蛋白酶处理鱼肉提取胶原蛋白，酶解条件是：pH1.5‑2.5、35℃‑40℃、酶解时间3h‑6h；离心分离：酶解后的鱼肉糜混合液通过离心分离，取上清液备用，沉淀作为鱼糜制品或通过干燥加工成为鱼粉；所述离心的转速2000转/min ‑3000转/min，离心时间10 min ‑15min；发酵液调节：在离心分离得到的上清液中加入葡萄糖、氯化钙、硫酸镁和磷酸氢二钠得发酵液，调节该四种物质在上清液中的质量浓度分别为1%‑3%、0.05%‑0.10%、0.05%‑0.10%、0.1%‑0.3%；调节发酵液的pH值为7.0‑7.5；降血压肽制备：在发酵液中接种枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），接种量为10%‑20%，35℃‑38℃发酵，发酵时间为20 h ‑25h；超滤：将发酵后的液体进行超滤分离，收集分子量在3000Da以下的肽组分；超滤压力在0.5 MPa ‑1.0MPa，室温操作；干燥：将分子量在3000Da以下的肽组分通过真空冷冻干燥获得降血压肽粉末产品；真空冷冻干燥时间20 h ‑30h，温度30℃‑35℃，真空度100 Pa ‑300Pa。