一种采用流式细胞术快速鉴定冬瓜倍性的方法

摘要

本发明提供一种采用流式细胞术快速鉴定冬瓜倍性的方法，包括以下几个步骤：步骤A:采集幼嫩叶片，将其冲洗灭菌后加入预冷、稀释后的改良裂解液，用预先灭好菌的锋利刀片将冬瓜叶片切碎；步骤B:将切碎后的冬瓜叶片用预先用裂解液浸泡过的尼龙滤网过滤到离心管中，再将滤液放入离心机，室温下离心，倒掉上清液，加入预冷的裂解液，混匀，再加入染液混匀，避光染色，得到样品；步骤C:采用流式细胞仪的稳定性，用荧光微球校准各荧光通道，确保各荧光通道采集的荧光信号变异系数小于2%；选择已知倍性的二倍体冬瓜为对照样品；待测样本上机检测，收集4000-5000个细胞核，得出样本流式散点图与荧光峰图。本发明从制备样品至结果分析完成一个样品只需要40min即可。

主权项

一种采用流式细胞术快速鉴定冬瓜倍性的方法，其特征在于，包括以下几个步骤：步骤A: 采集幼嫩叶片，将其冲洗灭菌后加入预冷的改良裂解液，用预先灭好菌的锋利刀片将冬瓜叶片切碎；步骤B:将切碎后的冬瓜叶片用预先用改良裂解液浸泡过的尼龙滤网过滤到离心管中，再将滤液放入离心机，室温下离心，倒掉上清液，加入改良裂解液，混匀，再加入稀释后的染液混匀，避光染色，得到样品；步骤C: 采用流式细胞仪的稳定性，用荧光微球校准各荧光通道，确保各荧光通道采集的荧光信号变异系数小于2%；选择已知倍性的二倍体冬瓜为对照样品；待测样本上机检测，收集4000‑5000个细胞核，得出样本流式散点图与荧光峰图。