基于石墨烯的提高葡萄糖氧化酶的热稳定性载体的制备方法

摘要

本发明涉及一种基于石墨烯的用于提高葡萄糖氧化酶（GOD）的热稳定性载体的制备方法。通过Hummers法制备得到氧化石墨烯（GO）；通过N,N-二甲基甲酰胺（DMF）还原HAuCl₄水溶液，恒温反应一定时间后，离心洗涤，将所得产品记为rGO/AuNPs。将rGO/AuNPs滴于玻碳电极表面，干燥后，将电极浸入一定浓度的GOD的水溶液中过夜，采用循环伏安法，对GOD的活性进行表征。结果表明GOD在rGO/AuNPs上表现了很好的热稳定性。在70^oC的恒温箱中放置24小时后，GOD仍然保持了其活性。在100^oC的烘箱中放置1小时，GOD才能完全失去活性。很好的热稳定性使GOD在高温条件下仍可以保持良好的生物活性，可广泛地应用于发酵、食品、饲料和医药等领域。

主权项

一种基于石墨烯的提高葡萄糖氧化酶的热稳定性载体的制备方法，其特征是该方法具有以下工艺步骤：第一步：通过Hummers法制备得到氧化石墨烯（GO）；第二步： 在1mg/mL的GO的N,N‑二甲基甲酰胺分散液中加入的质量分数为1 wt%～12.0 wt%的HAuCl₄水溶液、50～120μL的3‑氨丙基三甲氧基硅烷，加热到90～120^oC，恒温反应8小时～24小时后，离心洗涤三次，将所得产品分散在水中，记为rGO/AuNPs；第三步：将一定量的rGO/AuNPs分散液滴于玻碳电极表面，在空气中干燥后，将电极浸入一定浓度的GOD的水溶液中过夜；第四步：以第三步得到的电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝为对电极， pH6.0的磷酸缓冲溶液为电解液，采用循环伏安法，对GOD的活性进行表征；第五步：将工作电极在70 ^oC的恒温箱中放置24小时，采用第四步的方法对GOD的活性进行表征；第六步：将工作电极在100 ^oC的恒温箱中分别放置1分钟，5分钟，30分钟， 60分钟，并采用第四步方法对GOD的活性进行表征。