发明名称 |
杀菌肽LL-37的基因工程的表达及其制备方法和用途 |
摘要 |
杀菌肽LL-37的基因工程的表达及其制备方法及用途,包括合成编码杀菌肽LL-37的DNA序列,连接到适合的表达载体进行表达和纯化,其中编码杀菌肽LL-37的DNA序列,采用在大肠杆菌偏爱的密码子,在大肠杆菌融合表达系统表达的LL-37,占菌体总蛋白的20%左右。纯化后的融合蛋白经过溴化氰切断,得到目的多肽LL-37,经HPLC制备后得到纯度>90%的LL-37粉末。低浓度的LL-37就可在人体外用制剂方面可发挥巨大的杀菌效果,其作为外用药物如皮肤感染的治疗。本发明的优点是将杀菌肽LL-37以融合蛋白形式表达并制备,工艺简单,每立升发酵液收率可达20mg,具有工业量产意义。 |
申请公布号 |
CN103361341B |
申请公布日期 |
2015.09.02 |
申请号 |
CN201210083101.0 |
申请日期 |
2012.03.26 |
申请人 |
复旦大学附属华山医院 |
发明人 |
吴晓琰;陆怡;龚铁军 |
分类号 |
C12N15/11(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C07K14/00(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I;A61P31/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/11(2006.01)I |
代理机构 |
上海市华诚律师事务所 31210 |
代理人 |
李平 |
主权项 |
一种杀菌肽LL‑37的基因工程的表达方法,包括合成编码杀菌肽LL‑37的DNA序列,连接到表达载体:GST载体或pUC18载体或pEZZ载体,在原核表达系统大肠杆菌JM109中进行表达和纯化,其中LL‑37基因工程菌的表达载体中的单链DNA结构SEQ ID:‑CTG‑CTG‑GGT‑GAT‑TTC‑TTC‑CGT‑AAA‑AGC‑AAA‑GAA‑AAA‑ATC‑GGT‑AAA‑GAA‑TTC‑AAA‑CGT‑ATC‑GTT‑CAG‑CGT‑ATC‑AAA‑GAT‑TTC‑CTG‑CGT‑AAC‑CTG‑GTT‑CCG‑CGT‑ACC‑GAA‑AGC。 |
地址 |
200040 上海市乌鲁木齐中路12号 |